不同途徑移植細胞治療缺血性腦損傷的實驗研究.pdf

1、提要目的探討刺五加誘導后的骨髓基質干細胞(BoneMarrowStromalCells，BMSCs)不同途徑移植對大鼠缺血性腦損傷的治療作用的差異。方法貼壁法分離純化骨髓基質干細胞，經Brdu標記，用刺五加注射液誘導。采用WIStar雄性大鼠，線栓法復制大鼠MCAO模型。造模成功后隨機分為對照組10只、細胞尾靜脈移植組10只和細胞立體定向移植組10只另并假手術組10只，共4組。細胞尾靜脈移植組及細胞立體定向移植組大鼠在造模后72h分別經

2、尾靜脈、立體定向途徑移植誘導后骨髓基質干細胞(3火1擴個只)。觀察大鼠神經功能評分的變化、腦組織形態(tài)學變化、尼氏體的變化、缺血側腦組織中腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)表達水平和BMSCS的存活情況。結果細胞尾靜脈移植組和細胞立體定向移植組大鼠神經行為學、缺血區(qū)皮質錐體細胞結構較對照組均明顯改善(尸0.05)，缺血區(qū)腦皮質BDNF陽性表達水平亦明顯提高(P0.05)，其中細胞立體定向移植組較細胞尾靜脈移植組改善更為明顯(尸0.05)，Br

3、du陽性細胞數(shù)量更多(P0.05)。結論刺五加誘導后的骨髓基質干細胞移植能夠有效減輕大鼠局灶性腦缺血損傷所引起的神經功能缺損癥狀，其中立體定向途徑移植治療作用優(yōu)于尾靜脈移植。關鍵詞缺血性腦損傷骨髓基質干細胞:移植:腦源性神經營養(yǎng)因子刺五加目錄引言.............…….材料和方法.....................................................……2.1實驗動物..............

4、......................................……2.2實驗試劑....................................................……2.3實驗儀器....................................................……4.4培養(yǎng)用品的清洗和消毒滅菌....................................……51.4.

5、1玻璃器皿的清洗..........................................……51.4.2橡膠制品的清洗..........................................……51.4.3塑料制品的清洗..........................................……51.4.4培養(yǎng)用品的消毒滅菌(高溫濕熱滅菌法).........……，....……5.5實驗試劑配制...

6、.............................................……61.5.1青霉素、鏈霉素雙抗生素溶液的配制..............……‘...……61.5.2細胞完全培養(yǎng)液的配制....................................……61.5.30.4%臺盼蘭溶液的配制..................................……61.5.40.lmgml多聚賴氨酸溶液.

7、...............................……61.5.50.IM磷酸鹽緩沖液(PBS)...............................……61.5.64%多聚甲醛一0.IMPBS固定液..…，...........……，.....……61.5.70.01molL檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液(PH6.0).................……61.5.8蘇木素染液配制[[l..................

8、......................……71.5.9伊紅配制[2j..............................................……71.5.10胰蛋白酶液的配制.......................................……72.實驗方法........................................……2.1培養(yǎng)骨髓基質干細胞.......……2.1.1大鼠BM