CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在結(jié)核性胸腔積液中的分布和功能研究.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)結(jié)核性胸腔積液患者中CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg細(xì)胞）占CD4+T細(xì)胞的比例，及體外刺激物激活后的CD4+CD25+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例、細(xì)胞因子分泌情況，探尋CD4+CD25+Treg細(xì)胞在結(jié)核性胸腔積液中的分布和功能。
　　 方法：隨機(jī)選取正常成人6名，結(jié)核性胸腔積液患者15名，分別設(shè)為正常對(duì)照組及結(jié)核組。正常組抽取外周血標(biāo)本，結(jié)核組抽取外周血、胸腔積液及治療1個(gè)月后的外周血標(biāo)本，從上述

2、標(biāo)本中分離單個(gè)核細(xì)胞。將部分單個(gè)核細(xì)胞直接進(jìn)行流式細(xì)胞染色，運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4+CD25+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例;另一部分單個(gè)核細(xì)胞再細(xì)分為空白組、PMA/Ionomycin組、HMBPP組和PPD組，每組給予相應(yīng)的體外刺激，孵育6小時(shí)后行流式細(xì)胞染色，運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4+CD25+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例及細(xì)胞因子IL-22、IFN-γ的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：⑴結(jié)核組外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBM

3、Cs)中CD4+CD25+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例高于正常組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)核組治療前PBMCs中CD4+CD25+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例高于治療后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑵結(jié)核組胸腔積液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞(PFMCs)中CD4+CD25+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例顯著高于結(jié)核組PBMCs，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。⑶正常組PBMCs、結(jié)核組治療前后PBMCs、結(jié)核組P

4、FMCs經(jīng)HMBPP體外刺激后，CD4+CD25+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例均低于空白組、PPD組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。HMBPP組與PMA/Ionomycin組之間、PPD組與空白組之間差異均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。⑷正常組PBMCs、結(jié)核組治療前后PBMCs、結(jié)核組PFMCs經(jīng)體外刺激后，CD4+CD25+IL-22+Treg細(xì)胞占CD4+CD25+Treg細(xì)胞的比例均顯著高于同組CD4+CD25+IF

5、N-γ+Treg細(xì)胞，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。⑸正常組PBMCs、結(jié)核組治療后PBMCs經(jīng)HMBPP體外刺激后的CD4+CD25+Treg細(xì)胞產(chǎn)生IL-22的比例較空白組、PPD組及PMA/Ionomycin組的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。⑹結(jié)核組PBMCs經(jīng)HMBPP體外刺激后，CD4+CD25+IL-22+Treg細(xì)胞占CD4+CD25+Treg細(xì)胞的比例顯著高于空白組、PPD組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

6、HMBPP組低于PMA/Ionomycin組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。PPD組與空白組之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。⑺結(jié)核組PFMCs經(jīng)HMBPP體外刺激后，CD4+CD25+IL-22+Treg細(xì)胞占CD4+CD25+Treg細(xì)胞的比例顯著高于空白組、PPD組及PMA/Ionomycin組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。PPD組與空白組之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：CD4+CD2