番茄Cf-4-Avr4互作系統(tǒng)中信號(hào)傳導(dǎo)基因的克隆與功能分析.pdf_第1頁(yè)
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1、本論文利用病毒誘導(dǎo)的基因沉默技術(shù)和酵母雙雜交技術(shù),對(duì)這些cDNA片段進(jìn)行了篩選和功能研究。主要結(jié)果如下:  1.選擇了192個(gè)利用cDNA-AFLP分析技術(shù)獲得的差異表達(dá)的cDNA片段,用VIGS技術(shù)進(jìn)行了大規(guī)模的功能篩選。獲得了20個(gè)參與過(guò)敏反應(yīng)的cDNA片段,其中15個(gè)被沉默后,使Cf-4轉(zhuǎn)基因煙草的HR反應(yīng)減弱,另有5個(gè)被沉默后使HR反應(yīng)完全喪失,表明這5個(gè)基因在HR反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。  2.針對(duì)上述篩選出的20個(gè)cDNA片段

2、,通過(guò)PCR的方法已從番茄的全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)中獲得了其中的6個(gè)cDNA克隆,有兩個(gè)序列基本相同。它們的編碼蛋白分別與來(lái)源于辣椒的Bs2抗病基因編碼蛋白、擬南芥L19核糖體蛋白、擬南芥的一種GTP結(jié)合蛋白、擬南芥的一種TPR蛋白和甘薯的一種LRR(Leucine-RichRepeat)受體類蛋白激酶具有較高的同源性。  3.以RGL作為誘餌蛋白,采用酵母雙雜交方法,從番茄全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)中篩選出兩個(gè)與之互作的蛋白,分別命名為RGLIP-

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