孔石莼中體外抗氧化活性物質的研究.pdf

1、孔石莼是一種大型海洋經濟綠藻,在我國資源十分豐富。其味道鮮美,具有很高的營養(yǎng)價值與藥用價值。近些年來,孔石莼的工廠化育苗與人工養(yǎng)殖技術日趨完善,但關于它生物活性的研究還處于起步階段,遠遠跟不上養(yǎng)殖栽培的步伐,尤其是抗氧化生物活性,亟待開展研究工作對其進行系統(tǒng)評價。
　　本論文選取孔石莼作為研究對象,以自由基清除能力為體外抗氧化評價指標,篩選、分離、鑒定了孔石莼中的抗氧化物質,以期將孔石莼抗氧化活性的研究成果應用到天然抗氧化劑、疾病

2、治療藥物的開發(fā)上來。本研究主要取得如下研究成果:
　　(1)采用超聲輔助提取技術,用乙醇水溶液對孔石莼進行了提取,研究考察了浸提溫度、浸提料液比、乙醇濃度、超聲時間對可溶性固形物得率的影響,通過一系列單因素試驗及正交試驗分析,對孔石莼粗提物的提取條件進行了優(yōu)化,并對優(yōu)化結果進行了驗證。結果表明,最佳的提取條件為:浸提溫度60℃、浸提料液比1:25g/ml、乙醇濃度60％、超聲時間2h;在此條件下,孔石莼中可溶性固形物的平均得率為1

3、1.81%,相對標準偏差(RSD)為0.53%,表明結果具有較高的精密度與可靠性。
　　(2)采用液—液萃取方法對孔石莼的粗提物進行初步分離,以ABTS自由基清除能力、羥基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力為檢測指標進行綜合分析。結果顯示,正丁醇層具有較好的抗氧化能力。實驗選用D101型大孔樹脂對正丁醇層做進一步的分離純化,用不同濃度的乙醇溶液進行梯度洗脫,洗脫組分檢測其對自由基的清除能力,最終篩選出抗氧化能力較強的SR-50

4、組分作下一步的研究分析。為了得到較純的目標產物,研究首次應用中壓液相色譜快速純化工藝,系統(tǒng)分離純化了SR-50組分,在最適的洗脫條件(氯甲比=94:6)下,純化得到了SR-50-I組分,進行相應抗氧化能力的分析,發(fā)現(xiàn)SR-50-I組分對ABTS自由基、羥基自由基、DPPH自由基的清除作用均強于SR-50組分,說明經過中壓液相色譜的純化,物質中抗氧化活性成分的純度提高了。
　　(3)聯(lián)合應用紫外光譜分析、常規(guī)顯色反應及液質聯(lián)用方法對