葡萄籽原花青素對兔實驗性心肌缺血再灌注損傷的保護作用研究.pdf

1、目的 (1)通過實驗性心肌缺血再灌注損傷動物模型觀察GSP的抗心肌缺血再灌注損傷效應，并對其機制加以探討。 (2)觀察GSP對實驗兔心律失常的發(fā)生率和心肌梗死范圍的影響。 (3)觀察GSP對兔血清肌酸磷酸激酶(CK)及同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)、白介素6(IL-6)的影響。 (4)觀察GSP對兔心肌細胞凋亡的影響。 方法

2、 (1)建立模型和實驗分組：24只雄性新西蘭白兔，分籠喂養(yǎng)，飲水不限，飼料量為每只每天100-150g。觀察一周后進入實驗。隨機分為四組：假手術對照組、缺血再灌注對照組、GSP高劑量組(200mg/kg)、GSP低劑量組(100mg/kg)，每組6只。每日灌胃給藥1次，灌胃容積為2ml/kg。GSP高劑量組灌胃液中含GSP200mg/kg，GSP低劑量組灌胃液中含GSP100mg/kg，假手術組及缺血再灌注組僅給予等容積的飲用水。各組

3、兔均連續(xù)灌胃21天。 (2)標本的采?。焊鹘M兔分別于結扎前、結扎30min、再灌注20min、再灌注60min和再灌注120min時，自后肢小隱靜脈取血3ml，自然凝固后，以3000rpm/min離心10min，分離血清后保存于-80℃，測定肌酸磷酸激酶(CK)及同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮索(ET)和白介素6(IL-6)。于再灌注120min末處死動物，留取心臟作形態(tài)

4、學觀察和原位末端標記(TUNEL)檢查。 (3)測定方法：血清CK、CK-MB含量應用ENOEPRO型全自動生化分析儀測定。血清SOD、MDA、NO、ET、IL-6含量按試劑盒說明采用不同的方法分別對5個不同時間點的標本進行測定。兔心肌標本分別應用光鏡和透射電鏡觀察并拍照，并對其進行原位末端標記(TUNEL)染色。 (4)統(tǒng)計學處理：各項測定值均以均數(shù)±標準差((x)±s)表示，應用SPSS10.0統(tǒng)計分析系統(tǒng)，計量資料

5、處理均采用方差分析。 結果 與缺血再灌注對照組相比： (1)GSP明顯減輕了兔缺血再灌注時心肌細胞的破壞； (2)GSP對兔缺血再灌注時內(nèi)皮細胞自穩(wěn)態(tài)失衡、急性炎癥的影響并不顯著； (3)GSP具有減輕兔實驗性缺血再灌注損傷病變的效應，這一作用主要與其能夠清除自由基及減輕脂質過氧化損傷有關； (4)GSP能明顯阻抑動物心肌細胞凋亡的嚴重程度，提示GSP對細胞凋亡的抑制可能是其抗缺血再灌注損