RNAi干擾CXCR4表達對NCI-H446細胞株惡性潛能影響的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　本研究建立了表達CXCR4短發(fā)夾RNA(shorthairpinRNA，shRNA)的表達質(zhì)粒(pshRNA-CXCR4)，并在脂質(zhì)體的介導下轉(zhuǎn)染小細胞肺癌NCI-H446細胞株，用G418篩選CXCR4表達下調(diào)的細胞克隆。應(yīng)用MTT試驗、流式細胞術(shù)、趨化實驗(Boyden小室法)、RT-PCR、Westernblot等技術(shù)，比較研究了pshRNA-CXCR4轉(zhuǎn)染前后及SDF-1作用前后細胞增殖、細胞凋亡、細胞趨化的變化和對細胞胞漿

2、VEGF、bFGF表達的影響，以及胞漿Ca2+熒光強度、bcl-2、PCNA表達的變化，以探討pshRNA-CXCR4轉(zhuǎn)染抑肺癌增殖和轉(zhuǎn)移的分子機制。 本研究構(gòu)建在哺乳動物細胞中表達CXCR4shRNA的表達質(zhì)粒.并初步探討其對小細胞肺癌NCI-H446細胞株對CXCR4mRNA及蛋白的抑制作用。探討pshRNA-CXCR4表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染對人小細胞肺癌NCI-H446細胞株增殖、趨化運動的抑制作用。探討pshRNA-CXCR4表達

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