小鼠胰管結扎對內外分泌細胞功能的影響.pdf

1、研究目的：
　　 通過小鼠胰管的選擇性結扎，造成小鼠胰液局部引流障礙，形成胰腺炎表現，然后序貫性的觀察小鼠體重和血糖的改變，以及外分泌和內分泌細胞的形態(tài)和功能變化，并通過刺激手段，來進一步研究小鼠內分泌細胞，尤其是β細胞的功能變化，并為進一步開展相關實驗研究奠定基礎。
　　 研究方法：
　　 采用雄性8周齡的C57BL/6小鼠作為實驗研究動物，并隨機將48只小鼠分為胰管結扎手術組和假手術組，并在手術后1d、2d、

2、3d、5d、7d、10d、2w、4w、8w在兩組中分別取標本觀察和比較胰腺的大體觀變化以及內分泌和外分泌細胞的組織病理學變化，并針對內分泌細胞，尤其是β細胞的生物學特性，進行一系列特殊抗體的免疫組化染色。另外，將部分術后8w的小鼠通過鏈尿霉素（STZ）的腹腔低劑量持續(xù)注射，化學性的毀壞部分β細胞，使小鼠血糖輕度升高，但低于糖尿病標準，同時喂以含有核苷酸類似物（BrdU）的飲水進行增生細胞的標記，最后取標本行相應抗體染色觀察β細胞增生狀況

3、。所有圖片采用圖像分析軟件Image Pro Plus6.0處理，各數據統(tǒng)計結果以mean±SD表示，并采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進行各組數據的統(tǒng)計學分析，P<0.05認為具有統(tǒng)計學意義。
　　 研究結果：
　　 小鼠的胰腺大致分為三部分，即胃部胰腺（胃葉）、十二指腸部胰腺（十二指腸葉）、脾部胰腺（脾葉）。胰管結扎組小鼠在術前體重為22.5±0.5g；術后第1天，體重降至最低值，數值為20.0±0.7g；術后第2天開始

4、逐漸升高，第10天基本恢復至術前體重水平，22.3±1.1g；此后仍逐漸升高，處死前（術后第8周）體重達26.4±0.6g。而假手術組中，有類似趨勢，但各階段均較手術組明顯為重（p<0.05）。胰管結扎組小鼠術前術后血糖無明顯變化（p>0.05），假手術組小鼠術前血糖與手術胰管結扎組無明顯差異，術后血糖和術前血糖未出現明顯變化（p>0.05）。手術后8周的小鼠，在STZ注射前、注射后5天測血糖，發(fā)現血糖有輕度的升高（p<0.05），但低

5、于糖尿病標準。外分泌腺組織病理學變化：術后1天：胰腺間質水腫，小葉問的胰管擴張，腺泡腔輕度擴大；術后5天：明顯擴張的胰管和擴大的腺泡腔，部分結締組織增生，出現管樣組織；術后7天：外分泌腺明顯萎縮，腺泡細胞減少，腺泡腔極度擴張，胰管擴張進一步加重；術后4周：胰腺進一步萎縮，外分泌組織消失，代以脂肪組織，管樣組織仍然明顯可見較多的存在；術后8周：胰腺體積增大，但無外分泌組織，脂肪組織和纖維結締組織明顯，后者圍繞胰島和主管道；相應對照組的胰腺