日本囊對蝦中TLRs-TRAF6-ECSIT泛素化-DORSAL-IE1信號途徑鑒定及其功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景:
  先天免疫是動物啟動適應(yīng)性免疫應(yīng)答的基礎(chǔ),由于無脊椎動物僅具有先天免疫系統(tǒng),所以最初關(guān)于動物先天免疫機理的研究主要在無脊椎動物中進行,并且經(jīng)過長期的努力獲得了飛躍性的進展。在先天免疫調(diào)控過程中,對病原分子的識別是宿主非常重要的第一道防線。Toll樣受體(Toll-like receptor,TLR)是細胞上存在的一種普遍而且重要的先天免疫相關(guān)的模式識別受體。哺乳動物的不同TLR受體可以識別不同病原表面的病原相關(guān)分子模

2、式(pathogenassociated molecular pattems,PAMPs)。宿主識別不同的PAMPs后,引發(fā)下游不同的信號傳遞,進而引起下游的核轉(zhuǎn)錄因子激活與免疫效應(yīng)因子如促炎癥細胞因子的表達。在無脊椎動物中,果蠅的Toll信號途徑最早被發(fā)現(xiàn)并報道,但與脊椎動物的TLR信號途徑相比,對其信號識別和傳遞過程,還有許多未知的地方。自1992年以來,以對蝦為代表的無脊椎動物海產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速但病害頻發(fā),尤其是白斑綜合征病毒(W

3、SSV),其對對蝦養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大經(jīng)濟損失。鑒于此,多國科研人員紛紛開展對蝦抗病毒免疫機理的研究。近年來,對蝦免疫系統(tǒng)的多種相關(guān)信號蛋白分子的功能已經(jīng)被逐漸揭示出來,但是大部分研究還是針對單基因功能與表達水平的研究,沒有形成對蝦中免疫信號傳遞過程的系統(tǒng)認識。例如,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對蝦中存在多種TLR受體可能參與病原感染,但是這些受體是否在病毒感染中發(fā)揮作用,其引發(fā)的下游信號傳導(dǎo)過程如何都還有待研究。
  科學(xué)問題及意義:
  本

4、論文中,我們將根據(jù)實驗要求運用多種生物化學(xué)與分子生物學(xué)手段,鑒定出對蝦中參與識別病毒感染的重要MjTLR受體,并揭示病毒感染所引發(fā)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中重要的功能蛋白以及這些蛋白發(fā)揮作用的分子機理。為了解對蝦中病毒感染相關(guān)信號途徑的轉(zhuǎn)導(dǎo)和控制對蝦病毒病以及提高對蝦的先天免疫提供幫助。
  結(jié)果及創(chuàng)新點總結(jié):
  研究結(jié)果表明日本囊對蝦中存在一條TLR3-TRAF6/Ecsit泛素化-Dorsal-ie1促進病毒復(fù)制信號途徑。MjT

5、LR3識別病毒感染感染后,促進日本囊對蝦中MjTRAF6的上調(diào)表達、泛素化增加和與MjEcsit的相互作用的增加。MjTRAF6通過RING結(jié)構(gòu)域與MATH結(jié)構(gòu)域與MjEcsit相互作用,而其TRAF結(jié)構(gòu)域不與MjEcsit相互作用;病毒感染促進MjTRAF6的泛素化進而介導(dǎo)MjEcsit的泛素化,泛素化的MjEcsit與MjDorsal相互作用增加,且入核增加,在核內(nèi)泛素化的MjEcsit通過蛋白酶體依賴的途徑被降解,釋放MjDors

6、al與病毒ie1啟動子結(jié)合促進ie1基因的轉(zhuǎn)錄并促進病毒的復(fù)制,降低對蝦存活率。MjTLR1則通過引發(fā)相反的信號傳遞過程抑制這一信號傳遞,進而抑制病毒的復(fù)制,提升對蝦的存活率。而MjTLR2的功能則不明顯。
  研究的創(chuàng)新點:
  1、闡明了對蝦中三種MjTLRs在WSSV感染中的不同作用,MjTLR1和MjTLR3分別啟動抑制和促進病毒復(fù)制的信號途徑;MjTLR2則作用不明顯;
  2、闡明了在日本囊對蝦中,功能蛋白

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