B7-H分子在人腸癌腫瘤微環(huán)境表達的臨床意義及作用機制.pdf

1、本文對B7-H分子在人腸癌腫瘤微環(huán)境表達的臨床意義及作用機制進行了研究。本研究分為兩個部分：
　　 第一部分：協同刺激分子B7-H1在人結直腸癌中的表達及其臨床意義。
　　 目的：檢測結直腸癌組織中負性協同刺激分子B7-H1的表達,T細胞及其亞群的浸潤情況,分析其表達與腸癌臨床病理因素及患者生存時間的關系,探討B(tài)7-H1的表達在腸癌演進過程中的意義,進而探討其相關臨床意義。
　　 方法：收集112例手術切除的結直

2、腸癌組織和10例癌旁良性切端組織,整理其病理資料及生存時間；運用免疫組織化學法檢測B7-H1的表達與T淋巴細胞及其亞群的浸潤,統計學分析B7-H1的表達與患者臨床病理參數、預后程度及CD3+T、CD8+T淋巴細胞浸潤程度之間的相關性。
　　 結果：免疫組織化學法結果顯示,在112例結直腸癌組織中,B7-H1高表達58例,低表達54例,高表達率為51.8％；而正常腸組織幾乎不表達。統計學分析表明,B7-H1的表達水平與腫瘤部位和D

3、uke's分期密切相關(P<0.05),而與其他病理參數無關；CD3+T細胞浸潤程度與B7-H1分子表達水平呈負相關(P<0.001),而CD8+T細胞浸潤程度與其無關；生存分析顯示,B7-H1表達水平與腸癌患者總體生存率呈負相關(P<0.05)；此外,CD3+T細胞的浸潤程度與患者預后呈正相關(P<0.05),而CD8+T細胞的浸潤程度與患者預后無關。
　　 結論：負性協同刺激分子B7-H1在人結直腸癌組織中異常高表達,參與腫

4、瘤的進展。B7-H1可能通過下調T細胞的浸潤,進而抑制T細胞介導的腫瘤免疫應答,參與腸癌腫瘤免疫逃逸。對B7-H1分子的檢測在結直腸癌診斷和預后判斷中具有一定的臨床價值。
　　 第二部分：腫瘤B7-H1信號促進誘導產生調節(jié)性T細胞。
　　 目的：分析腸癌患者外周血及組織中T細胞及其亞群的浸潤情況和B7-H1分子的表達情況的關系；通過構建腸癌轉基因細胞株,探討B(tài)7-H1信號對腫瘤浸潤T淋巴細胞亞群的作用機制。
　　

5、 方法：用淋巴細胞分離液分離腸癌患者外周血及組織,收集外周血單個核細胞(PBMC)、組織中的浸潤淋巴細胞(TILs)和腫瘤細胞；通過免疫熒光標記法檢測并分析T細胞及其亞群；分析腫瘤組織B7-H1分子的表達與浸潤Tregs的相關性。運用脂質體轉染法構建腸癌轉基因細胞株SW480／B7-H1和SW480／Mock,將其與CD4+T細胞共培養(yǎng),運用免疫熒光標記法(FCM)和酶聯免疫吸附試驗(EIJSA)分別檢測Fregs及其細胞因子TGF-β

6、和IL-10的分泌情況,探討B(tài)7-H1信號對Tregs的誘導作用。
　　 結果：免疫熒光標記法結果顯示,腸癌患者組織中浸潤CD3+T細胞占浸潤淋巴細胞總數的67.1％,其中CD4+T／CD8+T的比值出現倒置,且CD4+CD25+Treg細胞的數量較健康人外周血顯著上升。此外,B7-H1高表達的組織中CD4+CD25+CD103+Tregs細胞的浸潤數量較B7-H1低表達的組織顯著增加。體外實驗也表明,腸癌轉基因細胞株SW480