缺氧對逼尿肌間隙連接蛋白Cx43表達的影響.pdf

1、目的：膀胱過度活動癥(OAB)的發(fā)病機制至今尚未完全清楚，而膀胱出口梗阻是其常見誘因。慢性膀胱出口梗阻后，膀胱有效血流量下降，隨著膀胱的貯尿及排尿形成反復的缺血再灌注現(xiàn)象。Azadzoi 等發(fā)現(xiàn)，血管阻塞性疾病及繼發(fā)缺血缺氧可誘導膀胱過度活動癥的形成。近年來有越來越多的研究表明，膀胱過度活動癥的發(fā)病機制可能涉及逼尿肌細胞超微結(jié)構(gòu)特性的改變,如間隙連接較正常的明顯增多，細胞間通訊功能亦較正常的加強。間隙連接的增多被認為是傳遞逼尿肌細胞異常

2、收縮的重要條件之一。本實驗通過建立大鼠膀胱逼尿肌細胞體外缺氧模型，探討缺氧對膀胱逼尿肌的間隙連接蛋白(Cx)43表達的影響。
　　 方法：取成年SD大鼠實驗組40只，建立膀胱出口梗阻模型組30只，模型對照組10只，其中模型對照組只行尿道分離術而不作結(jié)扎術。術后6周行充盈性膀胱測壓，確定膀胱過度活動癥組。另取健康SD幼鼠膀胱逼尿肌細胞行原代培養(yǎng)，并經(jīng)平滑肌特異性抗體證實。將培養(yǎng)細胞分成三組：缺氧組(A組): 連二亞硫酸鈉清除培養(yǎng)基

3、內(nèi)的氧，建立體外細胞缺氧模型；VitE預處理組(B 組): VitE預處理2小時后再行缺氧處理；以及正常對照組。通過Western blot，RT-PCR檢測各組逼尿肌Cx43及Cx43mRNA表達情況，并檢測丙二醛（MDA）質(zhì)量濃度。觀察氧化損傷對逼尿肌細胞間隙連接蛋白Cx43表達的影響。
　　 結(jié)果：⑴膀胱出口梗阻模型組大鼠中17只出現(xiàn)膀胱過度活動癥, 13只未出現(xiàn)不穩(wěn)定性膀胱收縮，OAB發(fā)生率為56.7 ％(17/ 30

4、) ，對照組無逼尿肌不穩(wěn)定收縮。⑵OAB組Cx43 和Cx43mRNA 相對表達均較對照組明顯升高(P<0.05)。⑶經(jīng)缺氧處理后，A、B組Cx43 和Cx43mRNA 相對表達均較對照組明顯升高(P<0.05)，A組表達最高，與B組比有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。逼尿肌細胞中Cx43 及Cx43mRNA的這種變化與反映氧化損傷程度的丙二醛質(zhì)量濃度變化相一致。提示缺氧可誘導逼尿肌細胞Cx43及Cx43mRNA表達增加，且與逼尿肌細胞的氧

5、化損傷程度相關。
　　 結(jié)論：①膀胱出口梗阻可引起多種排尿和儲尿功能障礙，是導致膀胱過度活動癥發(fā)生的主要原因。②正常膀胱逼尿肌存在少量間隙連接，是正常生理排尿得以完成的條件之一。膀胱過度活動癥逼尿肌細胞之間出現(xiàn)廣泛的間隙連接，是不穩(wěn)定膀胱發(fā)生的直接原因。③缺氧能誘導逼尿肌細胞Cx43及Cx43mRNA表達上調(diào)，且該誘導作用與逼尿肌細胞氧化損傷程度相一致，并且可被抗氧化劑VitE減弱。細胞缺氧可能是引起膀胱逼尿肌細胞之間出現(xiàn)廣泛的