VP3融合蛋白結構的改變影響其誘導人肝癌細胞凋亡活性.pdf

1、Apoptin是由雞貧血病毒CAV（Chicken Anemia Virus）編碼的小分子病毒蛋白，又稱VP3。研究發(fā)現(xiàn)，Apoptin能夠誘導不同組織來源的人腫瘤細胞凋亡；而在人正常二倍體細胞中，Apoptin處于未活化狀態(tài)，也不誘導細胞凋亡。Apoptin特異性誘導人腫瘤細胞凋亡，而對正常細胞無殺傷作用，有望成為一種理想的抑瘤制劑。蛋白質(zhì)一級結構的改變可使其高級結構發(fā)生相應的變化，而蛋白質(zhì)的空間構象是蛋白質(zhì)特有功能和活性的結構基礎。

2、實驗室前期實驗中已經(jīng)證實：在體外實驗中，PTD4-VP3融合蛋白具備誘導HepG2細胞凋亡的效應，而對人正常肝細胞L-02無致凋亡作用
　　 本研究旨在探討去除VP3重組體基因中無意義序列后，VP3融合蛋白質(zhì)可溶性表達以及蛋白質(zhì)活性效應的變化。本實驗利用基因工程重組技術，將VP3融合蛋白中幾段無意義序列逐一去除，從而比較重組體所表達融合蛋白與原PTD4-VP3融合蛋白可溶性表達情況，以及其特異性誘導腫瘤細胞凋亡得效應。探討蛋白質(zhì)

3、結構的變化對蛋白質(zhì)生物活性功能的影響。推動后續(xù)的VP3體內(nèi)外腫瘤治療實驗。實驗結果顯示重組后PTD4-VP3融合蛋白的可溶性表達相對重組前VP3融合蛋白有明顯差異。經(jīng)比較重組前后融合蛋白在不同濃度下孵育腫瘤細胞HepG2誘導腫瘤細胞凋亡的效應。觀察到不同PTD4-VP3融合蛋白誘導腫瘤細胞凋亡率有明顯差異。這一發(fā)現(xiàn)推動了實驗室PTD4-VP3融合蛋白的純化與大量制備。為VP3融合蛋白進一步應用于特異性誘導腫瘤細胞凋亡的體內(nèi)外實驗提供了支