同型半胱氨酸對(duì)大鼠細(xì)胞骨架蛋白Tau磷酸化及空間記憶的影響.pdf

1、老年斑(Senileplaque，SP)和神經(jīng)原纖維纏結(jié)(Neurofibrillarytangle，NFT)是阿爾茨海默病(ALzheimer'sdisease，AD)的主要神經(jīng)病理特征，前者由β-淀粉狀樣蛋白(β-amyloidpeptide，Aβ)沉積而成，后者是異常過(guò)度磷酸化的tau聚集成雙螺旋絲而構(gòu)成。tau是一種低分子量、可溶性的細(xì)胞骨架蛋白，與微管結(jié)合，促進(jìn)微管的組裝并維持其穩(wěn)定性。異常過(guò)度磷酸化的tau將失去上述功能。目

2、前大多數(shù)觀點(diǎn)認(rèn)為蛋白激酶和/或蛋白磷酸酯酶系統(tǒng)失衡是導(dǎo)致tau蛋白異常過(guò)度磷酸化的主要生化機(jī)制。同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)是蛋氨酸代謝的重要中間產(chǎn)物。在機(jī)體內(nèi)，Hcy主要經(jīng)“再甲基化”及“轉(zhuǎn)硫基反應(yīng)”途徑進(jìn)行代謝。自上世紀(jì)九十年代后期人們?cè)絹?lái)越感關(guān)注高Hcy與AD之間的關(guān)系。研究表明AD患者血漿Hcy顯著高于正常水平。有人提出假說(shuō)認(rèn)為，同型半胱氨酸在體內(nèi)蓄積通過(guò)使S-腺苷同型半胱氨酸增加，抑制蛋白磷酸酯酶2A(Pr

3、oteinphosphatase2A，PP-2A)的甲基化，使此酶ABαC三聚體形成減少，從而導(dǎo)致酶活性降低，進(jìn)而引發(fā)tau蛋白過(guò)度磷酸化、NFT的形成等神經(jīng)退性行變，促進(jìn)AD的發(fā)展。為探討Hcy對(duì)細(xì)胞骨架蛋白tau磷酸化的影響，給Wistar大鼠側(cè)腦室注射Hcy，使腦組織Hcy濃度升高，采用免疫印跡和免疫組化技術(shù)檢測(cè)大鼠海馬組織tau蛋白磷酸化水平及分布；用Westernblot檢測(cè)PP-2A催化亞基的表達(dá)水平；用Morris水迷宮檢

4、測(cè)大鼠的空間記憶能力。結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，(1)注射Hcy6h、9h、12h后，海馬組織tau蛋白磷酸化水平在Ser396/Ser404和Ser199/Ser202位點(diǎn)顯著升高，而24h后tau蛋白磷酸化又恢復(fù)到正常水平；(2)分別注射20mM、40mM、160mM和320mMHcy15μl6h后，海馬組織tau磷酸化水平在Ser396/Ser404和Ser199/Ser202位點(diǎn)明顯升高，并隨劑量增加呈上升趨勢(shì)；(3)免疫組化觀察