非甾體抗炎藥對食管癌細(xì)胞的抑制作用及其分子機制研究.pdf

1、目的:食管癌是嚴(yán)重威脅人類健康的惡性腫瘤之一.在中國河北的南部地區(qū),食管鱗癌的發(fā)生率是世界最高的,為199/100,000.雖然外科手術(shù)以及術(shù)后放療、化療是治療食管癌的有效手段,但術(shù)后5年生存率也只能達(dá)到30﹪左右.因此有必要尋求新的預(yù)防和治療食管癌的有效方法.最近流行病學(xué)調(diào)查和實驗研究證實非甾缽類抗炎藥(nonsteroidalanti-infiammatorydrugs,NSAIDs)如aspirin和NS-398 等具有化學(xué)預(yù)防和

2、治療食管癌的作用.方法:體外培養(yǎng)人食管癌細(xì)胞株TE13細(xì)胞,然后用不同劑量的aspirin和NS-398處理細(xì)胞一定時間.細(xì)胞增殖用MTT還原法檢測,細(xì)胞凋亡用透射電鏡和流式細(xì)胞學(xué)(flowcytometry,FCM)檢測.用反轉(zhuǎn)錄PCR(reversetranscriptionPCR,RT-PCR)檢測COX-2mRNA表達(dá),Westernblot檢測COX-2蛋白表達(dá).放射免疫測定(Radioimmunoassay,RIA)檢測PG

3、F<,1α>,合成.用電泳遷移率改變分析(ElectrophoreticMobilityShiftAssay,EMSA)檢測細(xì)胞NF-kB活性,Westernblot檢測細(xì)胞胞漿IkB蛋白水平.COX-2mRNA 表達(dá)水平,COX-2蛋白表達(dá)水平,IkB蛋白水平用Gel-Pro凝膠分析軟件進行半定量分析.所有數(shù)據(jù)均用<'->x±s表示,用SPSS統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,各組均數(shù)的比較行單因素方差分析(ANOVA),用最小顯著差法(l

4、eastsignificantdifference,LSD)作兩兩比較,P<0.05為有顯著性差異.結(jié)論:該研究首次從轉(zhuǎn)錄因子、基因轉(zhuǎn)錄、蛋白合成等多個層次系統(tǒng)研究了兩種NSAIDs,aspirin和NS-398,對人食管低分化鱗癌細(xì)胞株TE13細(xì)胞的抗癌作用機制,得出以下結(jié)論:l 兩種NSAIDs,aspirin和NS-398,可通過抑制人食管癌細(xì)胞株TE13 細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)揮抗食管癌作用.2 兩種NSAIDs,aspiri

5、n和NS-398,可通過抑制人食管癌細(xì)胞株TE13細(xì)胞COX-2mRNA和蛋白表達(dá),進一步抑制PGs的合成,從而發(fā)揮抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用.3 兩種NSAIDs,aspirin和NS-398,可通過增加人食管癌細(xì)胞株TE13細(xì)胞IkB蛋白水平,從而抑制NF-kB活性;而且抑制NF-KB活性是NSAIDs抑制COX-2mRNA和蛋白表達(dá)的上游機制.該研究首次證實NSAIDs對人食管癌細(xì)胞IkB—NF-kB—COX-2PGs增殖、凋亡