重組人瘦素對慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜（CITP）患者骨髓巨核細胞的影響.pdf

1、目的：ITP是一種慢性獲得性自身免疫性疾病，其特點是患者體內產生抗血小板抗體，導致網狀內皮系統(tǒng)破壞自身血小板。ITP的發(fā)病機制復雜，一般認為其發(fā)病機理主要為免疫因素導致血小板破壞過多，但血小板生成還與巨核細胞的正常凋亡密切相關，對于疾病過程中巨核細胞及其造血功能改變的研究尚不足。瘦素是一種對造血及免疫細胞發(fā)揮重要作用的因子，CITP患者血清瘦素水平升高，與血小板計數(shù)呈負相關，與血小板相關抗體IgG呈正相關，本研究旨在明確瘦素對CITP胃

2、髓巨核細胞是否有影響。 方法：以急性巨核細胞白血病細胞株M07e和CITP骨髓CD34+細胞經誘導分化的巨核細胞為研究對象。運用RT-PCR檢測MO7e細胞瘦素受體mRNA表達，運用Brdu-ELISA法檢測瘦素對M07e細胞的增殖作用，運用Annexin V/PI雙標流式檢測瘦素對M07e細胞的凋亡作用。經TPO、SCF誘導磁珠分選后獲得的CITP骨髓CD34+細胞分化為巨核細胞，運用流式測定瘦素對其分化過程中CD41a+、C

3、D61+的表達以及CD41a+細胞的凋亡是否有影響。 結果：瘦素受體長型Ob-RL和短型Ob-RS在M07e細胞均有mRNA表達。瘦素對M07e細胞的增殖有促進作用，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性，濃度為5ng/ml即顯示出促增殖效應(p=0.037)，但濃度在5、10、25ng/ml之間無明顯統(tǒng)計學差異，濃度為100ng/ml時其增殖效應最大。在時間依賴效應上，瘦素作用48h，其細胞增殖明顯高于24h，而作用72h其細胞增殖介于兩者之

4、間(p=0.000)。瘦素對M07e細胞具有抑制凋亡作用(p=0.001)，而且在作用72小時后凋亡率最高。瘦素對骨髓CD34+細胞分化為巨核細胞過程中CD41a+、CD61+表達的影響，與不加瘦素組相比無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。對CD41a+細胞凋亡的影響與不加瘦素組相比亦無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 結論：瘦素通過促進MO7e細胞的增殖，抑制其凋亡來參與巨核細胞自血病的發(fā)生、發(fā)展。瘦素在TPO+SCF誘導CIT