糖尿病腎病腎小球細胞間相互作用——氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮細胞生長因子和內(nèi)皮細胞.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察高糖和氯沙坦對培養(yǎng)的人腎小球系膜細胞、人臍靜脈內(nèi)皮細胞的SOD、CAT活性、MDA水平和VEGFmRNA表達與蛋白分泌的影響,以探討高糖在糖尿病腎病發(fā)生、發(fā)展中的機制及氯沙坦防治糖尿病腎病的作用;觀察高糖條件下系膜細胞對內(nèi)皮細胞的SOD、CAT活性、MDA水平和VEGFmRNA表達與蛋白分泌的影響,從而探討細胞間相互作用在糖尿病腎病發(fā)生、發(fā)展中的意義。 方法:采用內(nèi)皮細胞、系膜細胞單獨培養(yǎng)或內(nèi)皮細胞和系膜細胞共培養(yǎng)法,

2、將培養(yǎng)細胞分為正常對照組、高糖組、氯沙坦干預組和氯沙坦對照組,分別在培養(yǎng)的不同時間點,應(yīng)用比色法檢測細胞培養(yǎng)上清液中SOD、CAT活性和MDA水平、RT-PCR方法檢測細胞內(nèi)的VEGFmRNA表達水平及ELISA方法測定細胞VEGF蛋白的分泌。 結(jié)果:單獨培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞、系膜細胞高糖組上清液SOD、CAT活性比正常對照組明顯降低,MDA含量明顯升高(P<0.05);氯沙坦干預組SOD、CAT活性比高糖組明顯升高(P<0.05),

3、MDA含量明顯降低。 在3、6、12小時,單獨培養(yǎng)的系膜細胞高糖組VEGFmRNA表達比正常對照組顯著增加,氯沙坦干預組VEGFmRNA表達則下調(diào);3,6,12,24小時,單獨培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞高糖組VEGFmRNA表達高于正常對照組(P<0.05),氯沙坦干預組VEGFmRNA表達明顯降低。6、12、24小時,單獨培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞高糖組VEGF蛋白分泌增加(P<0.05),氯沙坦干預組VEGF蛋白分泌明顯降低;內(nèi)皮細胞和系膜細胞共培

4、養(yǎng)時,各組上清液SOD、CAT、MDA變化與單獨培養(yǎng)基本一致。即在二者共培養(yǎng)時,高糖組與正常對照組相比VEGFmRNA表達明顯升高(P<0.05),氯沙坦干預組VEGFmRNA表達明顯降低;VEGF蛋白分泌在高糖組中明顯升高,氯沙坦干預組明顯降低(P<0.05);內(nèi)皮細胞和系膜細胞單獨培養(yǎng)、共培養(yǎng)結(jié)果表明,共培養(yǎng)上清液中的SOD、CAT、MDA值、VEGFmRNA和蛋白分泌均高于相應(yīng)的單獨培養(yǎng)組。 結(jié)論:高糖可誘導內(nèi)皮細胞和系膜

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