學習記憶中磷酸化的CREB在大鼠丘腦前核內(nèi)的表達.pdf

1、丘腦前核（anterior thalamic nuclei，ATN）是背側丘腦的重要組成部分，它由三個亞核組成，分別為丘腦前核背側核(AD)，丘腦前核腹側核(AV)及丘腦前核內(nèi)側核(AM)，其功能與空間學習記憶相關。磷酸化的環(huán)磷酸反應元件結合蛋白(P-CREB)作為一種重要的核轉錄因子在空間學習與記憶的過程中也發(fā)揮著非常重要的作用。
　　目的:本實驗研究應用Morris水迷宮行為學實驗和免疫組織化學技術，通過觀察磷酸化的環(huán)磷酸反應

2、元件結合蛋白在大鼠丘腦前核的表達和分布情況，從而進一步研究并闡述P-CREB與學習記憶的關系，進而為P-CREB參與大鼠丘腦前核的學習記憶提供更新穎前沿的資料。
　　方法:實驗動物采用成年Wistar大鼠30只，雄性，體重200-250g。進行為期5天的Morris水迷宮行為學實驗后經(jīng)乙醚及4％水合氯醛腹腔注射麻醉，固定大鼠，暴露大鼠心臟，將灌注針頭經(jīng)左心室插入至升主動脈進行灌注。灌注完畢立即取腦，置于4％多聚甲醛固定液中4℃過夜

3、。次日使用震動切片機連續(xù)冠狀切片，片厚30μm。使用anti-CREB抗體作為標記物，采用免疫組化SABC法染色，在光鏡下觀察P-CREB在學習記憶過程中在丘腦前核內(nèi)的表達及分布情況，所有標本均采用同一套圖像分析系統(tǒng)進行拍照及分析，所得數(shù)據(jù)應用SPSS19.0軟件進行配對資料t檢驗。Morris水迷宮行為學實驗中實驗組不同時間逃避潛伏期比較采用單因素重復測量方差分析。
　　結果:1.Morris水迷宮行為學實驗結果:實驗組大鼠在經(jīng)

4、過為期4天的空間定位航行實驗后，第2，3，4天的“逃避潛伏期”與第一天的“逃避潛伏期”比較有顯著的縮短(P＜0.05)，說明實驗組大鼠具備一定的空間學習記憶能力，隨著空間定位航行訓練次數(shù)的增多，大鼠的空間學習能力將會提高，并且通過空間定位的學習成功建立了空間定位的學習記憶動物模型。
　　2.磷酸化的環(huán)磷酸反應元件結合蛋白免疫組織化學結果:在光鏡下可以看到P-CREB的陽性表達位于細胞核內(nèi)，主要呈圓形和橢圓形，并且在AV和AD區(qū)均有