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文檔簡介
1、復旦大學碩士學位論文β-amyloid寡聚體調節(jié)Munc-18表達及其相關效應研究姓名:錢淑文申請學位級別:碩士專業(yè):神經生物學指導教師:朱粹青20040520復旦 大學碩士學位論文 卜 淀 粉樣蛋白 寡聚 體調節(jié)M u n c - 1 8 表 達及 其相關效 應 研究3 .用S H - S Y 5 Y細胞轉染了 外 源m u n c - 1 8 基因, 然后進行了 免疫熒光雙標染色,結果顯示, 過表達M u n c - 1 8 的 細
2、胞內 磷酸化T a u 蛋白的 水平增加。為了 研究A p 寡 聚體誘導的M u n c - 1 8 表 達變化是否與T a u 磷 酸化相關, 我們對A p 寡聚體誘導M u n c - 1 8 表 達變 化的 細胞, 同 時 進行磷酸 化T a u 蛋白 檢 測。W e s t e r n b l o t 結 果 顯示, 當 處 理細 胞的A p 寡聚 體 濃度是1 n M時, A T 8 抗體檢 測到的 磷酸化T a u 蛋白
3、 水平 變 化與M u n c - 1 8 較一致, 而5 n M A p 作用 后,M u n c - 1 8 表 達 抑 制, 但T a u 蛋白 磷 酸 化 仍 有增 加。 另 外, A p 寡 聚 體 腦 室內注射后w e s t e m b l o t 檢測到大鼠 海馬內 磷酸化T a u 蛋白 水平增加, 也沒有與M u n c - 1 8 表 達 變化的 趨勢完 全一 致。 提 示 A 日 可 誘導 T a u磷 酸
4、化機制, 但M u n c - 1 8 可能只參與其中部分機制。4 . 最后, 我 們觀 察了A p 寡 聚體 對p - 淀粉 樣蛋白 前 體蛋白 ( A P P ) 的 影 響。 免疫 組織化學 和w e s t e r n b l o t 顯示A p 寡 聚體 ( 1 . 6 V M x 3 j . t 1 ) 的 作 用沒 有使 大鼠海馬內 總的A P P 發(fā)生顯 著變 化, 但是 我們 觀察到G o l g i 體內 的 酶
5、切形 成的分泌型A P P 片段減少,突觸小體內A P P 也減少。總 之, A p 1 - 4 。 寡 聚體可以 調節(jié) 培 養(yǎng)細胞和 大鼠 腦內M u n c - 1 8的 水 平; 同 時A p 寡聚 體可以 誘導 遞 質釋放、 T a u 蛋白 磷酸化、 A P P 轉 運代 謝的 變化。 通 過比 較A p 寡 聚體作 用后M u n c - 1 8 的 變 化以 及其它相 應效 應, 我 們推測M u n c - 1 8 可能
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