柳葉蠟梅提取物抑制HeLa細胞生長及誘導細胞凋亡的研究.pdf

1、柳葉蠟梅是畬鄉(xiāng)民間應用最廣泛的中草藥之一，民間用于腸胃不適及腹部脹痛等消化道疾病，現(xiàn)已被開發(fā)成山蠟梅葉顆粒和脾胃舒膠囊及保健茶等。脾胃舒膠囊在臨床觀察中發(fā)現(xiàn)對部分癌癥化療時的輔助治療臨床效果明顯，因此我們推測柳葉蠟梅具有抗腫瘤作用。
　　 研究目的：研究柳葉蠟梅提取物對人宮頸癌HeLa細胞的生長抑制作用，從細胞周期和細胞凋亡兩方面來考察細胞生長抑制及其可能機制。
　　 研究方法：應用噻唑藍(MTT)比色法、流式細胞定量檢

2、測、透射電鏡、Hoechst33258/PI染色、DNA電泳、RT-PCR.和Western印跡檢測等技術研究柳葉蠟梅提取物對HeLa細胞的增殖、細胞周期分布、凋亡以及p21mRNA水平和蛋白表達變化的情況。
　　 研究結果：(1)細胞生長抑制實驗結果顯示：a)溶劑吐溫-80對HeLa細胞的生長作用影響不大，與空白對照組比較無顯著性差異(P>0.05)；b)柳葉蠟梅提取物可明顯抑制HeLa細胞生長，隨著藥物濃度的增加，呈劑量依賴

3、性；c)柳葉蠟梅提取物對FL細胞生長抑制作用較小，與HeLa細胞的存活率相比具有顯著性差異；d)柳葉蠟梅含藥血清對HeLa細胞的增殖有抑制作用；(2)細胞周期檢測顯示柳葉蠟梅提取物可阻滯HeLa細胞于G2/M期；(3)透射電鏡觀察顯示，藥物處理組細胞表面微絨毛減少、染色質濃縮邊集，并見凋亡小體；(4)細胞核經(jīng)Hoechst33258染色顆粒狀熒光，而Pl染色無紅色熒光，即無壞死現(xiàn)象；(5)瓊脂糖凝膠電泳顯示細胞凋亡典型的DNA ladd