取代嘌呤類似物的設計、合成及抗病毒活性研究.pdf

1、慢性乙型肝炎是一種由乙型肝炎病毒引起的慢性、進展性、致死性疾病。我國是HBV病毒性肝炎的高發(fā)區(qū)。一直以來,核苷類似物拉米夫定作為首選藥物用于臨床治療乙型肝炎,但是隨著用藥時間的延長,拉米夫定顯示出嚴重的耐藥性和肝毒性。近年來,開環(huán)核苷膦類似物的9-(2-膦酰甲氧乙基)嘌呤類化合物PME類衍生物由于具有較好的抗病毒活性,耐藥率低,且高效低毒,因此得到了廣泛的重視。 阿德福韋酯作為開環(huán)的核苷膦類似物之一,在整個臨床前和臨床研究中,其

2、強效和安全性已經(jīng)得到廣泛的認可,于2002年上市用于治療HBV,其化學結構包含有腺嘌呤為堿基、直鏈醚鍵的側鏈、磷酸及雙吡呋酯等典型特征。臨床研究數(shù)據(jù)表明阿德福韋具有較強的抑制HBV DNA復制的作用,抗耐藥性強,顯著優(yōu)點是對拉米夫定應用后出現(xiàn)的YMDD變異株(包括YVDD和YIDD變異)病毒有很強的抑制作用,強度不低于對野生株的作用。長期應用阿德福韋治療慢性HBV,能顯著降低cccDNA水平,為循序漸進的清除感染細胞里的HBV病毒庫并清

3、除受感染細胞帶來希望。因此,阿德福韋既可用于對拉米夫定耐藥的患者,也可以用于對拉米夫定不敏感的患者,且阿德福韋治療劑量10 mg/d相關的毒副作用很低。不過,隨著近幾年研究的深入,發(fā)現(xiàn)阿德福韋在高劑量下有一定的腎毒性,也有文獻報道阿德福韋酯在體內(nèi)被酶水解釋放出阿德福韋,特戊酸和甲醛,當服用高劑量阿德福韋酯時,特戊酸可能會降低血清中的肉毒堿,而治療劑量范圍內(nèi)產(chǎn)生的甲醛,其毒性可以不需考慮。 本文通過分析總結開環(huán)核苷膦類似物的構效關

4、系,以阿德福韋為先導化合物,采用生物電子等排設計理論,設計N-6位替換成巰基取代物或氮取代物,同時8位引入氮雜的6-取代巰基-8-氮雜嘌呤堿基骨架,采取保留磷酸基和引入雙三氟乙基酯及乙酯三種形式。設計了三條反應路線,共合成了19個未見文獻報道新化合物。 首先以三氯化磷為起始原料,試圖經(jīng)過酯化、羥甲基化、磺酸酯化、烴化四步反應得到目標化合物。本路線在研究的初期并未取得成功,經(jīng)紅外圖譜確證發(fā)現(xiàn)第二步反應沒生成目標中間體。因此在此基礎

5、上設計了路線二：分別以5-氨基-4,6-二氯嘧啶及三氯化磷為起始原料,經(jīng)過烴化反應,環(huán)合反應、羥甲基化、鹵代、酯化等合成得到目標化合物。 在最初嘗試引入雙三氟乙基酯的合成方法時,意外得到了新的磷酸酯交換結構,此結構經(jīng)核磁氫譜、質(zhì)譜及紅外光譜確證為未見報道新的磷酸結構形式,目前已合成2個該類結構分子。 經(jīng)抗乙肝病毒活性測試結果表明,其中2-(6-氨基-9H-嘌呤-9基)乙基2,2,2-三氟乙基氯甲基磷酸酯(3-9)表現(xiàn)出了

6、抗病毒活性,在10μg/ml時對乙肝病毒表面抗原具有12.1％抑制率(HBsAg 抑制率),其抗病毒活性與拉米夫定相當(拉米夫定為14.2％);而且顯示了拉米夫定不具有的可抑制病毒復制的活性,對乙肝病毒e抗原(HBeAg)具有11.8％的抑制率,而拉米夫定為0％；毒性比阿德福韋酯大大降低,在50μg/ml時,阿德福韋酯表現(xiàn)出了細胞毒性,而新化合物3-9在100μg/ml還未出現(xiàn)細胞毒性。這個新的化學結構具有較高的繼續(xù)研究的價值,將在進一