PDTC對大鼠非酒精性脂肪肝病的治療作用及可能機制的實驗研究.pdf

1、目的：通過高脂飲食建立大鼠非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型，探討吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)對大鼠NAFLD的治療作用及可能機制。
　　 方法：52只雄性SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后隨機分為（1）、單純性脂肪肝：對照組8只，普通飼料飼養(yǎng)，第8w末繼續(xù)普通飼料飼養(yǎng)并生理鹽水0.3ml/day腹腔注射；模型組

2、10只，高脂飼料飼養(yǎng)；治療組8只，高脂飼料飼養(yǎng)；第8w末殺死2只模型組大鼠證明單純性脂肪肝模型建立，然后模型組停止高脂飼料飼養(yǎng)并生理鹽水0.3ml/day腹腔注射，治療組第8w末停止高脂飼養(yǎng)并PDTC100mg/kg/day腹腔注射，于第12w末處死所有大鼠；（2）、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)：對照組8只，普通飼料飼養(yǎng)，第12w末繼續(xù)普通飼料飼養(yǎng)并生理鹽水0.3ml/day腹

3、腔注射；模型組10只，高脂飼料飼養(yǎng)；治療組8只，高脂飼料飼養(yǎng)；第12w末殺死2只模型組大鼠證明NASH模型建立，然后模型組停止高脂飼料飼養(yǎng)并生理鹽水0.3ml/day腹腔注射，治療組第12w末停止高脂飼養(yǎng)并PDTC100mg/kg/day腹腔注射，于第16w末處死所有大鼠；檢測血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、甘油三酯

4、(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBS)、空腹胰島素(fasting insμlin,Fins)，計算出肝指數(shù)、空腹胰島素抵抗指數(shù)(fasting insμlin resistance index,FIRI)，HE染色、油紅O染色、Masson染色觀察肝

5、組織病理學變化，免疫組化測肝組織中NF-κB p65的表達水平，RT-PCR測肝組織中腫瘤壞死因子-alpha(TNF-α)mRNA、IL-6 mRNA、過氧化物酶體增殖物激活受體α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)mRNA等指標。
　　 結(jié)果：HE染色示成功構(gòu)建了單純性脂肪肝、NASH模型；單純性脂肪肝、NASH模型組與同期對照組比較，肝指數(shù)、ALT

6、、AST、TG、TC、FIRI均增加，HDL則減少(p＜0.05或p＜0.01)；治療組與同期模型組比較，肝指數(shù)、ALT、AST、TG、TC、FIRI均有所改善，HDL則增加(p＜0.05或p＜0.01)；HE染色、油紅O染色、Masson染色均示肝臟病理學改變較模型組好轉(zhuǎn)(p＜0.05)；免疫組化示NF-κB p65在胞核中表達較模型組下降(p＜0.05)；RT-PCR示TNF-α mRNA、IL-6mRNA均較模型組表達下降，PPA

7、Rα mRNA均較模型組升高(p＜0.05)；兩模型組間、兩治療組間肝指數(shù)、ALT、AST、TG、TC、FIRI、HDL、肝細胞脂肪變性程度、炎癥活動度、脂滴沉著面積、纖維組織面積、NF-κB p65、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、PPARα mRNA均有統(tǒng)計學差異(p＜0.05)。
　　 結(jié)論：⑴續(xù)8w的高脂飼料飼養(yǎng)成功構(gòu)建了SD大鼠單純性脂肪肝模型。⑵持續(xù)12w的高脂飼料飼養(yǎng)成功構(gòu)建了SD大鼠NASH模型。⑶PD