FN-整合素對哮喘大鼠氣道平滑肌細胞分泌功能的調控.pdf

1、目的:
　　 探討纖維粘連蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)-整合素對哮喘氣道平滑肌細胞(airwaysmooth muscle cells，ASMCs)分泌功能的調控。
　　 方法:
　　 利用組織貼壁法和多酶混合消化法原代培養(yǎng)大鼠ASMCs，并用細胞形態(tài)學和免疫組化SABC 方法鑒定；將正常大鼠和哮喘大鼠ASMCs 均分別種植在涂覆有 FN的和空白（無FN 涂覆）的玻片上，通過SP 免疫組化方法檢測細胞爬片

2、中粘著斑蛋白的表達。整合素抗體干預如上處理的正常及哮喘ASMCs，不做干預的如上處理的正常及哮喘ASMCs 作為對照組，采用RT-PCR方法檢測RANTES （regulated onactivated normal T cell expressed and secreted）、轉化生長因子-β1(transcriptiongowth factor-β1，TGF-β1)mRNA的表達水平；ELISA 方法檢測各組培養(yǎng)上清中RANTES

3、蛋白水平。
　　 結果:
　　 原代培養(yǎng)的細胞呈典型的“谷峰狀”生長，胞質內特異性的平滑肌肌動蛋白呈陽性表達，符合平滑肌細胞的形態(tài)學特征和生物學特性。FN 作用的哮喘大鼠ASMCs 粘著斑蛋白的表達明顯增加，但未經FN 作用的哮喘大鼠ASMCs 及經（或未經）FN 作用的正常大鼠ASMCs 粘著斑蛋白均呈陰性表達。在哮喘細胞中，F(xiàn)N 處理組較無FN 處理的空白組TGF-β1、RANTES mRNA的表達水平和細胞培養(yǎng)上清

4、中的RANTES 蛋白水平均顯著增加（P<0.05）；整合素抗體+空白組的RANTES、TGF-β1 mRNA表達水平和細胞培養(yǎng)上清中的RANTES 蛋白水平較空白組表達顯著減少（P<0.05）；整合素抗體+FN組的RANTES、TGF-β1 mRNA的表達和細胞培養(yǎng)上清中的RANTES 蛋白水平較FN 處理組表達顯著減少（P<0.05）。
　　 結論:
　　 FN 促進哮喘大鼠ASMCs 粘著斑蛋白的表達；FN-整合素