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文檔簡介
1、目的:觀察轉移抑制基因nm23-H1對經(jīng)香煙煙霧提取物處理的人肺腺癌細胞株A549侵襲能力的影響;并初步探討香煙煙霧提取物處理后A549細胞nm23-H1表達下調機制。
方法:應用含1%香煙煙霧提取物的培養(yǎng)液處理A54916周,16周細胞繼續(xù)給予脫毒培養(yǎng)8周,得到兩種處理后的細胞。應用nm23-H1野生質粒轉染上述兩種細胞,同時設置空質粒轉染組及未轉染組作為對照,采用RT-PCR和western blot分別檢測六組細胞中
2、nm23-H1的mRNA轉錄和蛋白表達水平;Transwell小室及劃痕試驗檢測細胞侵襲遷移能力;采用甲基化特異性PCR(MSP)檢測處理及未處理細胞的nm23-H1基因的甲基化水平。
結果: RT-PCR和western blot結果均顯示轉染野生質粒組細胞nm23-H1的mRNA轉錄和蛋白表達皆上調,與其他組相比差異具有顯著性;Transwell小室及劃痕試驗結果都表明轉染野生質粒組細胞遷移能力降低,與其他組相比差異具
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