胡桃楸水提物對白色念珠菌生物膜形成抑制作用的研究.pdf

1、目的:探討白色念珠菌生物膜對中藥胡桃楸水提物的敏感性。白色念珠菌易在人體內(nèi)形成生物膜且易對抗真菌藥物形成耐藥,因此首先應該對白色念珠菌在體外形成的生物膜進行形態(tài)學觀察,以便進一步了解其相關特征。本研究通過體外形成白色念珠菌生物膜結構,觀察白色念珠菌生物膜形成過程中不同時期的生長特點及形態(tài)特征,并以臨床常用抗真菌藥物兩性霉素B和卡泊芬凈為對照藥物,比較中藥胡桃楸水提物對白色念珠菌生物膜的作用效果,目的在探討胡桃楸水提物對白色念珠菌生物膜的

2、抑制作用,為臨床治療白色念珠菌感染提供理論依據(jù)。
　　 方法:本實驗采用6孔培養(yǎng)板,體外培養(yǎng)形成白色念珠菌生物膜結構,在顯微鏡下觀察不同培養(yǎng)時間的生物膜結構特點。另采用96孔培養(yǎng)板,體外培養(yǎng)形成白色念珠菌生物膜,以結晶紫染色法分析生物膜體外生長動力學,以XTT還原法定量測定胡桃楸水提物、兩性霉素B和卡泊芬凈三種藥物抑制白色念珠菌生物膜50%和80%細胞活性的最低藥物濃度,比較三種藥物抗白色念珠菌生物膜效力。
　　 結果:

3、白色念珠菌生物膜內(nèi)細胞數(shù)量隨培養(yǎng)時間延長而增加,最初8h膜內(nèi)細胞數(shù)量增加顯著,培養(yǎng)48h時,生物膜內(nèi)細胞數(shù)量達到最高并趨于穩(wěn)定,鏡下可見典型的成熟生物膜結構。2h組與4h組,8h組與12h組,48h組與72h組之間無明顯差別(P＞0.05),其他組間具有明顯差異(P＜0.05)。生物膜成熟時,細胞數(shù)量趨于平衡狀態(tài),但仍保持在高水平。隨培養(yǎng)時間延長,白色念珠菌生物膜耐藥性逐漸增強,而且對藥物的濃度具有一定依賴性。生物膜48h成熟時,胡桃楸