芹菜素增強阿司匹林對結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖抑制作用的實驗研究.pdf_第1頁
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1、分類號:R7353密級:學(xué)位類別:科學(xué)學(xué)位團(tuán)專業(yè)學(xué)位口@學(xué)校代碼:1062學(xué)號:2010602554學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)又肄簣科矢辱碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目:芹菜素增強阿司匹林對結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖抑制作用的實驗研究TITLEApigeninenhancestheproliferativeinhibitioneffectofaspirinoncoloncancercells一級學(xué)科:臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科:腫瘤學(xué)論文

2、作者:劉斌指導(dǎo)教師:巴一教授導(dǎo)師組成員:李爾廣教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中又于葡要目的:阿司匹林在結(jié)腸癌等腫瘤的防治中具有確切作用,但是長期服用阿司匹林引起的胃腸道出血等副作用制約了它的臨床應(yīng)用。黃酮類化合物是一類廣泛存在于植物中的食物多酚類化合物,具有包括抗腫瘤作用在內(nèi)的多種生物活性。芹菜素是一種在蔬菜、水果、茶葉中含量豐富的黃酮類化合物,具有抗腫瘤活性,有報道顯示它可以增強抗腫瘤藥物的抗腫瘤作用。

3、本研究旨在觀察芹菜素能否增強阿司匹林的抗結(jié)腸癌作用,并探討其機(jī)制。方法:選取HT029、HCA7、Moser和DLD1這4種結(jié)腸癌細(xì)胞系,設(shè)置陰性對照組、芹菜素(10gmol/L)單藥組、阿司匹林(25、5、10mmol/L)單藥組、聯(lián)合用藥組4種處理方式。將4種細(xì)胞種植在96孔培養(yǎng)板中,按上述4種處理方式處理細(xì)胞,在芹菜素單藥組和聯(lián)合用藥組中加10gmol/L芹菜素,2小時后在阿司匹林單藥組和聯(lián)合用藥組加不同濃度(25、5、10mmo

4、lFc)阿司匹林。每種處理方式設(shè)置3個復(fù)孔。置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24、48、72小時后,在每孔中加入MTT溶液,培養(yǎng)箱中放置4小時后,完全除去培養(yǎng)基,加入DMSO溶解結(jié)晶。將培養(yǎng)板置于在酶標(biāo)儀中,檢測吸光度值,計算細(xì)胞增殖抑制率。將Moser細(xì)胞種植在6孑L培養(yǎng)板中,不處理細(xì)胞,48小時后以裂解液裂解細(xì)胞,用SDSPAGE分離膠分離細(xì)胞中的蛋白質(zhì)并轉(zhuǎn)移到PVDF膜上,用COX2的抗體和HRP結(jié)合的二抗孵育,添加ECL顯色液后收集圖像,以此來

5、檢測4種細(xì)胞系的COX一2的表達(dá)。將Moser細(xì)胞種植在6孔板中,按上述4種處理方式處理細(xì)胞,48小時后以裂解液裂解細(xì)胞,用SDS—PAGE分離膠分離細(xì)胞中的蛋白質(zhì)并轉(zhuǎn)移到PVDF膜上,用COX2的抗體和HRP結(jié)合的二抗孵育,添加ECL顯色液后收集圖像,以此來檢測不同處理方式對COX2的蛋白表達(dá)的影響。將Moser細(xì)胞種植在6孔板中,用上述4種方式處理細(xì)胞,48小時后用Trizol提取細(xì)胞總RNA,進(jìn)行RTPCR,在瓊脂糖凝膠上電泳并收

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