番茄灰霉菌潛在生防菌的篩選鑒定及特性研究.pdf

1、從全國各地番茄種植園區(qū)采集土壤樣本152份，采用稀釋分離法共分離單菌落菌株174株，其中細(xì)菌88株，真菌86株，用于番茄灰霉菌生防菌的篩選。通過番茄灰霉菌的孢子萌發(fā)抑制試驗(yàn)、平板對(duì)峙培養(yǎng)試驗(yàn)得到對(duì)番茄灰霉病菌有明顯抑制作用的菌株共31株，其中細(xì)菌22株，真菌9株。選用平板對(duì)峙篩選試驗(yàn)中抑菌率50％以上的17株拮抗細(xì)菌菌株作離體葉抑菌試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌菌株HX21、QX41和QX42能持久而有效的抑制灰霉的生長，進(jìn)而進(jìn)行溫室盆栽試驗(yàn)，試驗(yàn)表明

2、，菌株HX21和QX41的無菌發(fā)酵原液均表現(xiàn)出對(duì)番茄灰霉病較好的防治效果，效果均好于殺菌劑百菌清500倍稀釋液，而菌株QX42作用稍差。相比之下，菌株QX42防效稍差。經(jīng)過分析，HX21發(fā)酵原液的防治效果與它的10倍稀釋也沒有顯著的差異，因此，它很有可能會(huì)被進(jìn)一步開發(fā)出一種有效的生防制劑。 對(duì)新篩選的灰葡萄孢生防細(xì)菌HX21、QX41和QX42的營養(yǎng)要求及發(fā)酵培養(yǎng)基配方進(jìn)行了研究使之達(dá)到最好的抑制效果。通過菌體產(chǎn)生量測(cè)定，結(jié)果表

3、明，菌株HX21、QX41和QX42最適培養(yǎng)基成分分別是：2.0％葡萄糖，1.0％酵母膏，0.5％NaCl，pH7.3；2.0％葡萄糖，1.0％胰蛋白胨，0.5％酵母浸膏，1.0％NaCl，pH7.4；1.0％胰蛋白胨，0.5％酵母浸膏，1.0％NaCl，pH7.4。試驗(yàn)表明，最利于細(xì)菌產(chǎn)生菌體的培養(yǎng)成分并不一定產(chǎn)生最好的抑菌活性，同時(shí)，在利用拮抗細(xì)菌的發(fā)酵液進(jìn)行生物防治的過程中，最重要的是要對(duì)病原菌有較強(qiáng)的抑菌效果，這就需要細(xì)菌生長過

4、程中的營養(yǎng)成分要保證抗菌物質(zhì)的抑菌活性達(dá)到最好，細(xì)菌HX21、QX41和QX42抗菌活性最好的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件分別是：1.0％蛋白胨，2.0％麥芽糖，0.5％NaCl，pH8.0、接種量為種子液的30％、28℃溫度下振蕩培養(yǎng)88h；1.0％牛肉膏，2.0％麥芽糖，1.0％NaCl，pH8.5、接種量為種子液的20％、28℃溫度下振蕩培養(yǎng)72h；1.0％牛肉膏，2.0％葡萄糖，1.0％NaCl，pH8.0、接種量為種子液的30％、26

5、℃溫度下振蕩培養(yǎng)80h。 對(duì)所篩選到的三個(gè)菌株進(jìn)行了分類學(xué)鑒定，其中細(xì)菌HX21和QX41經(jīng)細(xì)菌形態(tài)、培養(yǎng)性狀觀察以及多項(xiàng)生理生化試驗(yàn)鑒定為芽孢桿菌屬(Bacillusspp.)。同時(shí)，通過防效廣譜性試驗(yàn)，生防細(xì)菌對(duì)小麥根腐病(Bipolarissorokinian)，小麥赤霉病(Fusariumgraminearum.)，玉米大斑病(Exserohilumturcicum)，立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)，甜

6、瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporum)，辣椒疫霉病(Phytophthoracapsici)對(duì)峙培養(yǎng)試驗(yàn)表明，三菌株對(duì)小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌、甜瓜枯萎病菌、立枯絲核病菌有較好的抑菌作用，且有明顯的抑菌帶出現(xiàn)，從而表明HX21、QX41和QX42的菌體具有較廣的抑菌譜，能抑制多種病原菌，尤其是能抑制多種病原真菌，因此具有較好的應(yīng)用前景。 用菌絲生長法對(duì)HX21、QX41和QX42無菌發(fā)酵液有效物質(zhì)的性質(zhì)進(jìn)行初步研究，