健胃愈瘍顆?？瓜詽儚?fù)發(fā)的作用及其抗炎機(jī)制的研究.pdf

1、目的：通過臨床研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察健胃愈瘍顆粒(簡(jiǎn)稱JWYY)抗消化性潰瘍(Peptic Ulcer，PU)復(fù)發(fā)的作用，并觀察其對(duì)PU愈合和復(fù)發(fā)過程中胃黏膜炎癥及核因子κB(Nuclear Factor-kappa B，NF-κB)、β-防御素-2表達(dá)的影響，以期從炎癥角度揭示JWYY抗PU復(fù)發(fā)作用的機(jī)制。 方法： 1．臨床研究：經(jīng)胃鏡和組織學(xué)及尿素酶檢查證實(shí)幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)陽(yáng)性的

2、PU且中醫(yī)辨證屬肝郁脾虛型的患者50例，隨機(jī)分為健胃愈瘍顆粒試驗(yàn)組(簡(jiǎn)稱JWYY組)和西藥對(duì)照組各25例；另取Hp陰性PU患者17例設(shè)為Hp陰性PU對(duì)照組；胃鏡及組織學(xué)均大致正常且Hp陰性者8例設(shè)為健康對(duì)照組。JWYY組服健胃愈瘍顆粒劑3g/∥次，3次／d，連服6w。西藥對(duì)照組服滅滴靈0.4g bid，阿莫西林1.Og bid，連服7d；奧美拉唑腸溶片20mgbid，連服6w。兩組停藥后4w復(fù)查胃鏡，進(jìn)行胃鏡療效、Hp根除率、證候療效及

3、生活質(zhì)量評(píng)定，兩次胃鏡檢查時(shí)均取胃竇黏膜行蘇木素．伊紅(HE)染色、免疫組化、免疫印跡(Western blot)、原位雜交檢查，觀察胃竇炎癥程度、檢測(cè)NF-κBp65、β-防御素-2蛋白及mRNA表達(dá)。對(duì)潰瘍愈合的患者進(jìn)行隨訪，統(tǒng)計(jì)PU一年復(fù)發(fā)率。Hp陰性PU對(duì)照組及健康對(duì)照組不作治療和復(fù)查，只取一次標(biāo)本行上述檢查。 2．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：將116只大鼠隨機(jī)分為5組，即正常對(duì)照組(18只)、假手術(shù)對(duì)照組(18只)、模型組(32只)、J

4、WYY組(24只)，奧美拉唑?qū)φ战M(24只)。采用改良Okabe乙酸涂抹法復(fù)制實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍模型，正常對(duì)照組不造模，假手術(shù)對(duì)照組以生理鹽水代替乙酸，造模后24h，JwYY組、奧美拉唑?qū)φ战M分別灌胃JWYY和奧美拉唑藥液，量分別為0.08lg、0.36mg／lml／100g體重，其余各組灌服蒸餾水，量均為lml／100g體重，每天1次。造模第90d，再將模型組大鼠隨機(jī)分為模型組和模型復(fù)發(fā)組，腹腔注射白細(xì)胞介素-1β(interleukin-

5、lβ， IL-lβ)(lμg／kg體重)復(fù)制胃潰瘍復(fù)發(fā)模型，模型組以生理鹽水代替IL-lβ。分別于造模第8d、16d、92d(即復(fù)發(fā)潰瘍誘導(dǎo)后48h)均分3批處死各組大鼠，剖腹取胃，在觀察胃大體情況、對(duì)胃潰瘍指數(shù)(Gastric ulcer index，GUI)進(jìn)行檢測(cè)后，剪取胃竇部含潰瘍的(無(wú)潰瘍者在相應(yīng)部位取材)胃組織行HE染色觀察組織學(xué)改變，免疫組化、免疫印跡、原位雜交檢測(cè)NF-kBp65、β-防御素-2蛋白及mRNA表達(dá)。

6、 結(jié)果： 1．臨床研究：①．JWYY組完成6w治療和復(fù)查者24例，胃鏡觀察臨床痊愈12例，顯效7例，有效4例，無(wú)效1例；Hp根除11例，根除率為45.8％；中醫(yī)證候觀察臨床痊愈lO例，顯效8例，有效4例，無(wú)效2例；PU疾病量表分值較治療前顯著提高。與西藥對(duì)照組比較，胃鏡療效無(wú)顯著差別(P>0.05)，Hp根除率較低(P<0.05)，而中醫(yī)證候和生活質(zhì)量改善優(yōu)于西藥對(duì)照組(均P<0.05)；②JWYY組完成1年隨訪者16例，復(fù)發(fā)

7、1例，復(fù)發(fā)率6.25％；西藥對(duì)照組完成1年隨訪者15例，復(fù)發(fā)l例，復(fù)發(fā)率為6.67％。兩組一年復(fù)發(fā)率比較無(wú)顯著差別(P>0.05)。③．Hp陽(yáng)性PU患者胃竇慢性炎癥和活動(dòng)性程度較Hp陰性PU對(duì)照組顯著增強(qiáng)，JWYY能顯著減輕Hp陽(yáng)性PU患者胃竇慢性炎癥和活動(dòng)性程度(分別P<0.01、P<0.05)，與西藥對(duì)照組比較無(wú)顯著差別(均P>0.05)。④．NF-KBp65mRNA和蛋白表達(dá)有失活和活化兩種狀態(tài)，Hp陽(yáng)性PU患者胃黏膜NF-KBp

8、65tuRNA和蛋白激活，表達(dá)水平較Hp陰性PU對(duì)照組和健康對(duì)照組顯著上調(diào)(均P<0.01)，經(jīng)JWYY和西藥治療后均較治療前顯著下調(diào)(均P<0.01)，JWYY組和西藥對(duì)照組之間比較無(wú)顯著差別(均P>0.05)；NF-KBp65mRNA和蛋白表達(dá)與胃竇慢性炎癥和活動(dòng)性程度均呈正相關(guān)(均P<0.01)。⑤．β-防御素-2mRNA和蛋白在健康對(duì)照組胃黏膜無(wú)明顯表達(dá)，在Hp陰性PU對(duì)照組少量表達(dá)，而Hp陽(yáng)性PU患者表達(dá)顯著上調(diào)(均P<0.0

9、1或0.05)，主要位于胃黏膜表層上皮細(xì)胞胞漿。經(jīng)JWYY和西藥治療后均較治療前顯著下調(diào)(P<0.01或0。05)，JWYY組和西藥對(duì)照組之間比較無(wú)顯著差別(均P>0。05)；β-防御素-2mRNA和蛋白表達(dá)與胃竇慢性炎癥和活動(dòng)性程度均呈正相關(guān)(均P<0.01)。⑥．NF-κBp65mRNA和蛋白表達(dá)與β-防御素-2rnRNA和蛋白表達(dá)均呈正相關(guān)(均P<0.01)。 2．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：①．胃潰瘍?cè)炷５?d，經(jīng)乙酸造模的各組大鼠胃黏膜

10、肉眼觀察和組織學(xué)檢查均可見到潰瘍病灶，但潰瘍程度不一，模型組GUI最高，JWYY組、奧美拉唑?qū)φ战MGUI均顯著低于模型組(P<0.01或0.05)。16d，除模型組3只見淺小潰瘍外，其余各組大鼠潰瘍均已愈合，JWYY組和奧美拉唑?qū)φ战M愈合潰瘍組織形態(tài)學(xué)表現(xiàn)優(yōu)于模型組。92d，模型復(fù)發(fā)組、JWYY組、奧美拉唑?qū)φ战M復(fù)發(fā)率分別為87.5％、12.5％、25％，后二者與前者比較有顯著性差異(均P<0.01)。JWYY組和奧美拉唑?qū)φ战M所見再生

11、黏膜較厚，修復(fù)較完全，排列較整齊。②8d、16d模型組、92d模型復(fù)發(fā)組潰瘍邊緣或再生黏膜慢性炎癥細(xì)胞和中性粒細(xì)胞密度均顯著高于正常和假手術(shù)對(duì)照組(均P<0.01)，JWYY組、奧美拉唑?qū)φ战M均較同期模型組或模型復(fù)發(fā)組顯著減低(P<0.01或0.05)。慢性炎癥細(xì)胞和中性粒細(xì)胞密度與GUI、潰瘍復(fù)發(fā)呈正相關(guān)，與愈合呈負(fù)相關(guān)。③正常和假手術(shù)對(duì)照組NF-κzBp65mRNA和蛋白呈失活狀態(tài)；8d、16d模型組、92d模型復(fù)發(fā)組潰瘍邊緣或再生

12、黏膜NF-κzBp65mRNA和蛋白激活，表達(dá)較正常和假手術(shù)對(duì)照組顯著上調(diào)(均P<0.01)，JWYY組和奧美拉唑?qū)φ战M表達(dá)均較同期模型組或模型復(fù)發(fā)組顯著減低(P<0.01或0.05)。NF-κzBp65mRNA和蛋白表達(dá)與慢性炎癥細(xì)胞密度、中性粒細(xì)胞密度均呈正相關(guān)(均P<0.01)。④β-防御素-2mRNA和蛋白在正常和假手術(shù)對(duì)照組大鼠胃黏膜表層上皮細(xì)胞有表達(dá)，8d模型組、JWYY組和奧美拉唑?qū)φ战M潰瘍邊緣均無(wú)明顯表達(dá)。16d模型組、

13、92d模型復(fù)發(fā)組表達(dá)顯著高于正常和假手術(shù)對(duì)照組(P<0.01或0.05)，JWYY組和奧美拉唑?qū)φ战M表達(dá)均較同期模型組或模型復(fù)發(fā)組顯著下調(diào)(P<0.01或0.05)；β-防御素-2mRNA和蛋白表達(dá)與慢性炎癥細(xì)胞密度、中性粒細(xì)胞密度均呈正相關(guān)(均P<0.01)，與NF-κBp65mRNA和蛋P白表達(dá)呈正相關(guān)(均p<0.01)。 結(jié)論： 1．JWYY能顯著改善肝郁脾虛型Hp陽(yáng)性PU患者生活質(zhì)量。JWYY能有效的促進(jìn)PU愈合