

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、研究背景:肝細胞肝癌是我國最常見的腫瘤之一,隨著治療方法和影像技術(shù)水平的提高,早期肝癌切除術(shù)后的五年生存率已達50%-75%,但肝癌伴有門靜脈癌栓預(yù)后很差,其中位生存期僅為2.7月,而肝癌無門靜脈癌栓患者的中位生存期達24.4個月。肝細胞肝癌容易侵犯肝內(nèi)血管特別是門靜脈,癌栓易于在主瘤附近的門靜脈血管內(nèi)形成,約有30%-60%的肝癌病人常常伴有門靜脈癌栓。門靜脈癌栓的特征迫切需要我們了解其發(fā)生的分子機制,找到治療肝癌伴門靜脈新的的方法,
2、發(fā)現(xiàn)門靜脈癌栓分子學(xué)標(biāo)記物,從而為臨床治療提高新的靶點。 肝癌的發(fā)生發(fā)展是由多基因參與、多步驟協(xié)同的復(fù)雜過程。盡管所有的細胞都擁有同樣的基因組,但在不同的細胞內(nèi)會有不同的基因處在活躍狀態(tài),從而合成不同的蛋白質(zhì)。同樣,不同細胞的差異在很大程度上也是由功能基因及其合成蛋白質(zhì)的不同來決定的,因而需要在整體水平上分析肝癌細胞內(nèi)蛋白的動態(tài)變化。隨著后基因組時代的到來,以雙向電泳、質(zhì)譜分析為主的蛋白質(zhì)組學(xué)的方法和手段為腫瘤研究提供了良好的技
3、術(shù)平臺,蛋白質(zhì)組研究直接定位于蛋白質(zhì)水平,從整體、動態(tài)、定量的角度去研究腫瘤發(fā)生過程中蛋白質(zhì)種類、數(shù)量的改變。不僅有助于進一步揭示腫瘤的發(fā)病機制,亦有助于發(fā)現(xiàn)能進行早期臨床診斷的腫瘤標(biāo)記物(biomarker)。 本研究通過雙向電泳的方法研究肝癌原發(fā)灶與門靜脈癌栓之間蛋白表達的差異,探討這些差異蛋白在肝癌門靜脈轉(zhuǎn)移過程中的作用。從而尋找到作為門靜脈癌栓形成的標(biāo)記物和治療門靜脈癌栓新的靶點。 材料和方法:1.材料收集200
4、5年1月至2005年6月間東方肝膽外科醫(yī)院的肝癌伴門靜脈癌栓手術(shù)患者的手術(shù)標(biāo)本5例。 2.方法收集標(biāo)本都經(jīng)-80℃液氮凍存,組織經(jīng)研磨后加入裂解液,超聲裂解,高速離心(15000轉(zhuǎn)/分)1小時后收集上清液,Bradford法測定蛋白濃度。雙向電泳:經(jīng)等一相電聚焦電泳(非線性pH3-10)和二相十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳后,用雙胺銀染法(分析膠)和考馬斯亮藍(制備膠)染色。掃描獲取圖象,用PDQuest
5、7.0軟件進行斑點檢測和匹配分析。差異蛋白點切膠,膠上酶解,抽提酶解肽段,ZipTip脫鹽,MALDI-TOF質(zhì)譜,軟件分析數(shù)據(jù),鑒定出差異蛋白質(zhì)。Westernblot驗證差異蛋白的表達。 結(jié)果: 1.原發(fā)灶和門靜脈癌栓標(biāo)本進行2次2-DE以保證試驗的重復(fù)性共獲得各組20塊2D膠圖譜,蛋白表達譜均類似,多集中分布于pI4-9間的區(qū)域。 2.用PDQuest7.0軟件將蛋白圖譜分成2個類別進行點的鑒定.原發(fā)灶組平
6、均點數(shù)1350±78,癌栓組點數(shù)1230±53。 3.參考膠進行兩組之間的匹配分析,篩選出在超過2例以上,灰度均存在2倍以上的差異點20個。 4.通過質(zhì)譜分析和NCBI數(shù)據(jù)鑒定結(jié)果:包括膜聯(lián)蛋白A5(AnnexinV)、分泌性外源性血凝結(jié)素1(Glactin1)、過氧化物還原酶1(peroxiredoxin1)、細胞核增殖抗原(PCNA)、高遷移率族蛋白框1(HMBG1)等在內(nèi)的20個差異蛋白。 5.Wester
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 肝細胞性肝癌及門靜脈癌栓差異表達蛋白質(zhì)組分析及意義.pdf
- 肝細胞癌門靜脈癌栓形成機理研究.pdf
- 伴門靜脈癌栓肝癌的蛋白組學(xué)研究.pdf
- 肝細胞肝癌合并門靜脈癌栓的外科治療(78例病例分析).pdf
- 原發(fā)性肝細胞肝癌伴門靜脈癌栓肝切除術(shù)后的預(yù)后.pdf
- 肝細胞癌合并門靜脈癌栓多學(xué)科診治中國專家共識
- 肝細胞癌轉(zhuǎn)移特性的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 原發(fā)性肝癌門靜脈癌栓形成臨床相關(guān)因素探討.pdf
- 肝癌門靜脈癌栓激光消融治療的研究.pdf
- 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的改進及對肝細胞肝癌的研究.pdf
- 肝癌伴門靜脈癌栓介入治療的實驗研究.pdf
- 肝癌合并門靜脈癌栓的手術(shù)風(fēng)險分析.pdf
- 外陰鱗狀細胞癌相關(guān)蛋白的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 肝癌門靜脈癌栓放射治療敏感性研究.pdf
- 人肝細胞癌組織和組織間隙液的蛋白質(zhì)組研究.pdf
- 肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 手術(shù)+TACE對肝細胞肝癌合并門靜脈癌栓的治療效果及預(yù)后因素分析.pdf
- 利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)尋找血清肝癌相關(guān)性蛋白質(zhì).pdf
- 肝癌門靜脈癌栓經(jīng)脾胃底食管曲張靜脈栓塞和門靜脈支架治療的研究.pdf
- 原發(fā)性肝細胞癌根治術(shù)后近期復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移相關(guān)血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
評論
0/150
提交評論