應用組織芯片技術和免疫組化方法篩選鼻咽癌預后相關分子標記物.pdf

1、背景與目的：鼻咽癌是我國華南地區(qū)最常見的惡性腫瘤之一，流行病學調(diào)查和病因學研究顯示，其發(fā)病與環(huán)境、遺傳、EB病毒感染等因素的作用密切相關。腫瘤局部復發(fā)和遠處轉移是導致治療失敗的首要原因。目前臨床使用的傳統(tǒng)臨床分期用于判定鼻咽癌患者預后存在一定不足，具有相同臨床分期的鼻咽癌患者，預后有明顯差異。因此，尋找有效的鼻咽癌分子標記物來預測患者預后對鼻咽癌的治療意義重大。 材料與方法：選取中山大學腫瘤防治中心病理科1990-2002年期間

2、有相應臨床隨訪資料的鼻咽癌組織標本280例，構建成4張鼻咽癌組織芯片，用免疫組織化學方法分別檢測p53、LMP-1、Survivin、VEGF、CD147、LYVE-1和CD31等分子標記物在鼻咽癌組織中的表達，分析上述分子標記物的表達與鼻咽癌臨床病理變化和患者預后的關系。 結果：1.鼻咽癌組織各分子標記物表達與臨床病理變化及預后的關系(1)p53陽性表達率為94/247(38.06％)，鼻咽癌組織p53的表達與患者性別、年齡、

3、TNM分期、T分期、淋巴結轉移、復發(fā)及遠處轉移無關(P＞0.05)；p53在鼻咽癌組織中表達陰性組和陽性組患者5年總生存率分別為56.20％及58.85％，生存率沒有顯著性差異(P=0.8071)。 (2)LMP-1陽性表達率為130/200(65％)，LMP-1在鼻咽癌組織中的表達與淋巴結轉移正相關(P＜0.05)；與患者性別、年齡、TNM分期、T分期、復發(fā)及遠處轉移無關(P＞0.05)；鼻咽癌組織LMP-1表達陰性組和陽性組

4、患者5年總生存率分別為56.62％和56.13％，無顯著性差異。 (3)Survivin陽性表達率為108/206(52.43％)，鼻咽癌組織Survivin的表達與原發(fā)灶的侵犯范圍、TNM分期及淋巴結轉移正相關(P＜0.05)，與患者性別、年齡、局部復發(fā)和遠處轉移無關(P＞0.05)；鼻咽癌組織Survivin表達陰性和陽性組患者5年總生存率分別為70.54％和42.32％，總生存率差異顯著(P=0.0006)；晚期患者鼻咽癌

5、組織Survivin表達陰性和陽性組5年總生存率分別為73.41％和36.51％，總生存率差異顯著(P=0.0002)。 (4)VEGF陽性表達率為86/188(45.74％)，鼻咽癌組織VEGF的表達與TNM分期、復發(fā)及遠處轉移正相關(P＜0.05)，與患者的性別、年齡、T分期及淋巴結轉移無關(P＞0.05)；鼻咽癌組織VEGF表達陰性和陽性組患者5年總生存率分別為67.75％和40.11％，總生存率差異顯著(P=0.0028

6、)；晚期患者鼻咽癌組織中VEGF表達陰性和陽性組5年總生存率分別為65.22％和35.03％，總生存率差異顯著(P=0.0025)。 (5)鼻咽癌組織中存在Survivin與VEGF協(xié)同表達的104例標本，兩者表達同為陽性患者5年生存率為18.22％，同為陰性患者5年生存率為73.54％，Survivin與VEGF表達同為陽性的鼻咽癌患者總生存顯著低于同為陰性患者(P=0.0003)。 (6)CD147陽性表達率為121

7、/204(59.31％)，CD147在鼻咽癌組織中的表達與遠處轉移正相關(P＜0.05)，與性別、年齡、TNM分期、腫瘤原發(fā)灶侵犯范圍、有無淋巴結轉移及局部復發(fā)無關(P＞0.05)；鼻咽癌組織中CD147表達陰性組和陽性組患者5年總生存率分別為66.08％及45.20％，差異顯著(P=0.0009)。 (7)LYVE-1的高表達率為87/185(47.03％)，鼻咽癌組織中LYVE-1的表達與腫瘤局部復發(fā)正相關(P＜0.05)，

8、與性別、年齡、TNM分期、鼻咽癌原發(fā)灶的侵犯范圍、淋巴結轉移以及遠處轉移無關(P＞0.05)；LYVE-1高表達組患者5年生存率為47.89％，低表達組5年生存率為65.17％，差異顯著(P=0.0231)。 (8)鼻咽癌組織微血管密度(MVD)(-χ)±s=31.38±14.51，腫瘤組織中MVD與腫瘤復發(fā)及遠處轉移存在相關性(P＜0.05)，與患者性別、年齡、TNM分期、腫瘤原發(fā)灶侵犯范圍、淋巴結轉移無關(P＞0.05)。鼻

9、咽癌組織MVD＞32(均數(shù))組患者5年生存率為42.32％，MVD=32組5年生存率為61.03％，差異顯著(P=0.0022)。 2.各分子指標在鼻咽癌中表達的相關性(1)Survivin與LMP-1在鼻咽癌組織中的表達正相關(r=0.256，P=0.004)；而p53和LMP-1，p53和Survivin的表達之間沒有相關性(P＞0.05)。 (2)Survivin與VEGF在鼻咽癌組織中的表達正相關(r=0.265

10、，P=0.002)；LYVE-1和VEGF表達正相關(r=0.45，P=0.001)。CD147與VEGF，CD147與MVD之間的表達都沒有相關性(P＞0.05)。 (3)Cox回歸模型分析結果提示TNM分期及蛋白VEGF、CD147、LYVE-1表達均是鼻咽癌獨立的預后因子，TNM分期晚及蛋白VEGF、CD147、LYVE-1高水平表達患者預后較差，P值分別為0.012、0.021、0.000和0.023。 結論：1

11、.組織芯片技術具有體積小、信息含量大等優(yōu)點，是病理學研究高效快速的工具。 2.p53在鼻咽癌組織的表達與性別、年齡、臨床分期、復發(fā)、遠處轉移及預后無關；LMP-1高表達者更易發(fā)生淋巴結轉移；Survivin高表達與臨床分期、T分期及淋巴結轉移正相關，是鼻咽癌患者尤其是晚期患者預后不良指標。 3.VEGF在鼻咽癌的高表達與TNM分期、復發(fā)及遠處轉移有關；CD147高表達患者更易遠處轉移；LYVE-1高表達患者更易復發(fā)；MV