Tankyrasel反義寡核苷酸抑制肺癌細胞生長作用的基礎研究.pdf

1、在腫瘤細胞和永生化細胞中,端粒酶介導的端粒延長與端粒結合蛋白1(TRFl)對端粒長度的負調控作用之間處于動態(tài)平衡,使端粒維持在一特定長度.近來發(fā)現一種新的端粒酶系統調控酶—端錨聚合酶1(Tankyrasel,TANKl),在細胞間期TANKl與TRFl結合共同定位于染色體末端,催化TRFl核糖基化而從端粒脫落,以便于端粒酶延伸端粒序列.該酶是調控端粒復制中最為明確的一環(huán),是細胞癌變機制和癌癥靶標研究的新熱點.國外的研究現狀為對TANKl

2、結構及其細胞核內、外定位功能方面的探討,少數學者報道了TANKl在某些惡性腫瘤中表達水平上調,并與hTERT(人端粒酶逆轉錄酶)的表達呈明顯正相關.國內文獻僅限于對該酶相關功能的綜述性報道.國內、外罕見TANKl反義核酸作用于惡性腫瘤研究的相關文獻報道.該課題旨在探討TANKl反義寡核苷酸對人肺癌細胞系CALU增殖的影響.目的:探討TANKl反義寡核苷酸對人肺癌細胞系CALU增殖的抑制情況,為肺癌基因治療的靶標研究探索新途徑.方法:設計

3、合成TANKl正義寡核苷酸(TANKl-SODN)、反義寡核苷酸(TANKl-ASODN),待人肺癌細胞株CALU裸鼠蹊部皮下接種成瘤后,將成瘤裸鼠隨機分成3組:對照組4只,正義組與反義組各5只.采用瘤體多位點注射的方法觀察實體瘤的生長情況及腫瘤組織學、電鏡癌細胞超微結構的改變;免疫組織化學SABC(鏈霉親和素-生物素-酶復合物)法檢測3組肺癌細胞中Ki67(細胞核增殖抗原)與hTERT蛋白的陽性表達水平;hTERT TSP<'ZYME

4、D>原位雜交SABC染色系統檢測3組癌細胞中hTERT mRNA的陽性表達情況.結論:1、人肺癌細胞系CALU中Ki67蛋白、hTERT蛋白及其mRNA呈高水平表達,TANKl與hTERT表達異常增加可能是癌細胞增殖活躍的重要原因,這幾種基因的表達異?？赡茉诜伟┌l(fā)生及惡性進展過程中發(fā)揮重要作用.2、TANKl-ASODN對裸鼠體內的CALU肺癌細胞的增殖具有明顯的抑制作用,可有效降低肺癌細胞中Ki67蛋白、hTERT蛋白及其mRNA的表