表沒食子兒茶素沒食子酸酯穩(wěn)定性對其抗癌細胞增殖的影響.pdf

1、茶是世界范圍內最流行的飲品之一。在它的諸生物學功能當中，抗腫瘤作用受到了最大的關注。到目前為止，茶中活性成分及其抗腫瘤機制尚不清楚。表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)是茶活性成分當中含量最多的一種，同時，在抑制腫瘤及相關研究中表現的活性也最強。通過EGCG對細胞系作用的研究，獲得了大量關于茶生物學活性可能機制的信息。在許多體外實驗中，指標的檢測通常是在EGCG加入到培養(yǎng)基幾個小時甚

2、至幾天以后，因此，很難判斷活性物質的主要作用靶點以及明確作用機制。一些研究表明，EGCG在培養(yǎng)基中會發(fā)生自氧化作用，其半衰期很短；自氧化過程中會產生超氧自由基，而超氧化物歧化酶(SOD)對其具有很好的清除作用。 在研究中，用MTT方法檢測EGCG對人結腸癌細胞HT-29、人乳腺癌細胞系MCF-7、人宮頸癌細胞Hela三種細胞生長的影響；通過檢測培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶(LDH)的活性，判斷EGCG對這三種細胞的毒性作用；用流式細胞儀檢

3、測EGCG對人結腸癌細胞HT-29的凋亡誘導情況；通過培養(yǎng)基中是否含有SOD判斷SOD對上述研究的影響。用HPLC和LC/MS方法判斷EGCG在培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性。 MTT結果表明：EGCG對HT-29、MCF-7和Hela三種細胞生長的抑制作用呈現濃度依賴性。培養(yǎng)基中加入SOD后，EGCG對這三種細胞生長的抑制作用增強。培養(yǎng)中LDH的活性在加入SOD后升高，表明在SOD存在的情況下EGCG對細胞的毒性作用增強。HT-29細胞在E

4、GCG作用下凋亡率低，SOD加入后使EGCG促凋亡作用有所上升。EGCG在培養(yǎng)這三種細胞的培養(yǎng)基中的半衰期大約為1h或45min；加入SOD后，EGCG的半衰期提高到8h，表明SOD使培養(yǎng)基中EGCG的穩(wěn)定性增強。LC/MS分析表明：EGCG在本研究中的自氧化產物可能含有P2(分質量884)和脫氫二聚體(分子量912)?？梢姡琒OD使EGCG的穩(wěn)定性提高，使其抑制腫瘤細胞增殖的作用增強。因此，在以后有關EGCG在細胞培養(yǎng)基中的研究不能忽