泛素連接酶hHrd1在帕金森病大鼠模型中的表達及其意義.pdf

1、泛素蛋白酶體通路是真核細胞內降解調節(jié)因子等短壽蛋白的重要途徑，它參與細胞內很多重要的生理生化過程，如DNA修復、細胞周期的運轉、信號傳遞、抗原的呈遞、蛋白的跨膜定位等[1]。近年發(fā)現(xiàn)泛素－蛋白酶體系統(tǒng)可能與神經(jīng)變性疾病的病理過程有關，認為泛素-蛋白酶體系統(tǒng)的損害造成細胞內的異常蛋白質聚集，異常聚集的蛋白質造成神經(jīng)元的凋亡，可能是帕金森病(Parkinson'sDisease，PD)多巴胺能神經(jīng)元缺失的機制。 目的：①制作帕金森病

2、大鼠模型，并以間腦多巴胺含量及超微結構的變化評定；②觀察此模型學習記憶能力的變化；③定位定量檢測泛素連接酶hHrd1在PD模型中的表達，并探討其意義。 方法：①應用立體定向儀，經(jīng)大鼠黑質和內側前腦束兩靶點微量注射6-OHDA，制作帕金森病模型，2周后阿撲嗎啡腹腔注射，篩選成功模型。毛細管電泳法測定PD模型間腦多巴胺含量，透射電鏡觀察黑質區(qū)域超微結構的變化。②分別在術后一月和術后三月用Morris水迷宮檢測模型學習記憶障礙；③免疫

3、組化檢測泛素連接酶hHrd1在PD模型中的表達，westernblot定量分析。 結果：①注射6-OHDA到黑質和內側前腦束雙靶點，通過大鼠旋轉實驗測試，造模成功率為68％，損毀側多巴胺含量明顯減少，黑質神經(jīng)元數(shù)目明顯減少，線粒體腫脹，粗面內質網(wǎng)囊性擴張、脫顆粒，髓鞘擴張。②PD模型鼠尋找平臺的游泳距離明顯增加，且呈時間依賴關系。③泛素連接酶hHrd1在PD模型中呈高表達，且呈區(qū)域性，如黑質、紅核、中縫核及韁內側核呈強陽性。