五倍子用于根管內(nèi)糞腸球菌感染的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、糞腸球菌(Enterococcus faecalis)為鏈球菌科,腸球菌屬的代表種，是健康人體的上呼吸道、口腔或腸道的常駐菌，也是重要的條件致病菌。近來的研究發(fā)現(xiàn)，糞腸球菌的感染往往會(huì)導(dǎo)致根管治療的失敗。由于糞腸球菌極易侵入牙本質(zhì)小管，且具有超強(qiáng)的生存能力，僅依靠根管預(yù)備和充填無法將其完全清除，必須借助于有效的根管消毒藥物才能治療其引起的感染。而目前臨床常用的一些根管消毒藥物要么對(duì)其效果不佳，要么毒副作用過大，因此，尋找一種既安全又能有

2、效殺滅牙本質(zhì)小管內(nèi)的糞腸球菌的消毒藥物，對(duì)提高根管治療效果具有重要意義。
　　五倍子富含五倍子鞣質(zhì)，具有良好的抗菌特性。有研究表明，其水提物對(duì)感染根管內(nèi)的厭氧菌具有廣譜抗菌作用，水煎劑對(duì)引起院內(nèi)感染的糞腸球菌耐藥菌株有理想的殺滅效果。另外，作為天然藥物，五倍子具有不易產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性和對(duì)人體毒副作用低的特點(diǎn)，提示其有可能成為安全有效的理想根管消毒藥物。
　　本研究通過觀察五倍子對(duì)浮游態(tài)、離體牙根管和單一生物膜中的糞腸球菌的殺滅

3、效果，對(duì)糞腸球菌膠原粘附以及對(duì)根管壁顯微硬度的影響，以探討其用于治療糞腸球菌根管感染的可能性。
　　實(shí)驗(yàn)一:五倍子水提取物對(duì)糞腸球菌抑制作用的體外實(shí)驗(yàn)
　　采用試管液體二倍稀釋法，測(cè)定五倍子水提取物對(duì)糞腸球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的最小抑菌濃度(MIC)和殺菌濃度(MBC)，并同時(shí)與鞣酸標(biāo)準(zhǔn)品和氯己定進(jìn)行對(duì)比，觀察比較五倍子水提取物對(duì)其體外抑制作用。結(jié)果顯示，五倍子水提取物在體外對(duì)于糞腸球菌有良好的抑制作用，能在6.25mg/mL的濃度起

4、到殺菌的效果。
　　實(shí)驗(yàn)二:五倍子水提取物對(duì)感染牛牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌殺滅效果的體外研究
　　采用牛牙本質(zhì)小管糞腸球菌感染模型檢測(cè)五倍子水提取物對(duì)牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌的殺滅效果，使用氯己定作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明二者均能完全殺滅牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌，雖然五倍子需要的作用時(shí)間稍長，但是1d后兩者的作用沒有差異。
　　實(shí)驗(yàn)三:五倍子水提取物對(duì)單一生物膜中糞腸球菌活性影響的體外研究
　　在玻片上形成24h糞腸球菌生物膜，

5、熒光探針染色后通過CLSM觀察五倍子處理對(duì)單一生物膜中糞腸球菌活性的影響，使用氯己定作為陽性對(duì)照。結(jié)果顯示，經(jīng)五倍子處理后，生物膜中活菌比例顯著下降,隨著處理時(shí)間的延長，死菌進(jìn)一步增多，處理30min后生物膜中絕大多數(shù)為死菌。且生物膜經(jīng)五倍子處理后較氯己定組菌體更為分散。
　　實(shí)驗(yàn)四:五倍子水提取物抑制糞腸球菌粘附能力的體外研究
　　本實(shí)驗(yàn)包括兩個(gè)部分。首先利用底部鋪有膠原蛋白的細(xì)胞培養(yǎng)板，觀察五倍子的處理對(duì)于糞腸球菌粘附膠

6、原的影響；然后利用掃描電鏡考察五倍子處理對(duì)于糞腸球菌粘附牙本質(zhì)的影響。結(jié)果顯示，五倍子預(yù)處理膠原蛋白和牙本質(zhì)大大降低了糞腸球菌對(duì)二者的粘附能力。
　　實(shí)驗(yàn)五:五倍子水提取物對(duì)根管壁顯微硬度的影響的體外實(shí)驗(yàn)
　　使用牛牙根管段制作顯微硬度測(cè)試件，五倍子水提取物處理不同的時(shí)間后測(cè)試根管壁的顯微硬度，使用EDTA作為對(duì)照。結(jié)果五倍子處理1d、7d后，顯微硬度均數(shù)稍有下降，但與處理前無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p＞0.05），而陽性對(duì)照組處理10