短暫缺血缺氧后神經頓抑現象中離子通道的研究.pdf

1、在已建立的神經頓抑模型上研究各種離子通道的改變，為研究短暫缺氧血清剝奪/復氧復注血清后尋找神經細胞頓抑現象存在的確切證據并探討其演變規(guī)律、探索短暫性腦缺血再灌流后產生的神經細胞頓抑現象的本質與特點、揭示神經細胞頓抑現象在短暫性局灶性腦缺血后細胞損傷和自身調節(jié)保護機制中可能的生物學作用與意義。將細胞分為對照組和缺血組，應用電生理膜片鉗技術記錄缺氧復氧后海馬神經元的各種鉀通道的電流活動。經p-CLAMP軟件進行采樣儲存數據，用sigmapl

2、ot8.0軟件進行數據的處理和圖像分析。缺血缺氧再灌流后KATP電流增加，在復氧2小時后電流達到最大值，然后逐漸下降，其他的鉀電流有所下降，當KATP電流逐漸恢復的時候，其他的電流有所增大。用KATP阻斷劑格列苯脲后，其他的鉀電流增大。胞內透析PKC阻制劑H-7，KATP通道可以被阻斷。在短暫缺氧血清剝奪復氧復注血清后，存在各種K+離子通道活動頻繁改變，其中以KATP為重點研究對象，隨著復氧時間的延長，可以部分恢復。因此對于缺血再灌流后

3、存在神經頓抑現象提供有力的佐證。 骨髓基質細胞(MSCs)又叫骨髓間充質干細胞1。是成年哺乳動物骨髓中存在的特殊的非造血組織干細胞，具有多種分化潛能2。我室褚倩3等人對骨髓間充質干細胞誘導分化后的神經樣細胞利用免疫組化和westemblot進行了鑒定，發(fā)現在利用二甲基亞砜(DSMO)和丁羥茴醚(BHA)誘導分化后，大部分MSCs變成雙極，多極和雛形，并相互交織成網狀結構，巢蛋白(Nestin)在誘導分化前不表達，在誘導分化后6h

4、達到最高,24小時和48小時逐漸降低。神經元特異核蛋白(NeuN)在誘導分化前不表達，在誘導分化后6小時出現表達,24小時和48小時表達增強。因此得出結論,MSCs經體外誘導先分化為神經干細胞，然后分化為神經樣細胞。但是對于該神經樣細胞是否具有電生理特性未作研究，國內也未見相關類型的報道.本文在以往人員的講究基礎上，利用電生理膜片箝技術對分化的神經樣細胞進行了離子通道的研究，觀察其是否具有電生理特性。 本文利用電生理膜片箝技術共檢