姜黃素聯(lián)合5-氟尿嘧啶對(duì)肝癌細(xì)胞的抑制作用及其對(duì)COX-2、NF-κB蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:探討姜黃素聯(lián)合5-氟尿嘧啶抗肝癌細(xì)胞(SMMC-7721及Bel-7402)的增殖及其對(duì)SMMC-7721細(xì)胞COX-2、NF-κB蛋白表達(dá)的影響。
　　方法:用MTT比色法檢測(cè)姜黃素、5-氟尿嘧啶單用及聯(lián)合運(yùn)用對(duì)肝癌Bel-7402和SMMC-7721細(xì)胞的增殖抑制作用;用Western Blot檢測(cè)姜黃素與5-氟尿嘧啶在不同比例下作用于肝癌SMM C-7721細(xì)胞48h后COX-2、NF-κB蛋白的表達(dá)情況，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用

2、單因素方差分析及LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果:1、姜黃素和5-氟尿嘧啶單用對(duì)肝癌SMMC-7721及Bel-7402細(xì)胞增殖的抑制作用呈現(xiàn)濃度依賴性，兩藥單獨(dú)作用于肝癌SMMC-7721細(xì)胞48h的IC50值分別為(89.06±11.85)和(21.90±1.54)μmol/L，作用于肝癌Bel-7402細(xì)胞48h的IC50值分別為(94.74±4.03)和(38.48±2.27)μmol/L;2、分析聯(lián)合

3、運(yùn)用姜黃素和5-氟尿嘧啶作用于肝癌細(xì)胞株24h、48h及72h的增殖抑制作用，作用于肝癌SMMC-7721細(xì)胞24h與48h的抑制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，24h與72h的抑制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，48h與72h的抑制率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，作用肝癌Bel-7402細(xì)胞24h、48h與72h的抑制率兩兩之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);3、根據(jù)姜黃素與5-氟尿嘧啶聯(lián)合作用肝癌細(xì)胞48h后引起抑

4、制率為50％時(shí)的濃度，計(jì)算出引起抑制率為50％時(shí)的CI值，我們得出當(dāng)姜黃素和5-氟尿嘧啶的比例為1∶4時(shí)，其對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞的聯(lián)合作用為拮抗，其余比例為協(xié)同作用，當(dāng)姜黃素和5-氟尿嘧啶的比例為1∶2和2∶1時(shí)，對(duì)肝癌Bel-7402細(xì)胞的聯(lián)合作用為拮抗，其余比例為協(xié)同作用;4、聯(lián)合組與對(duì)照組、單用組比較NF-κB、COX-2蛋白的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，聯(lián)合組較對(duì)照組細(xì)胞核的NF-κB的表達(dá)增強(qiáng)，而細(xì)胞漿的NF

5、-κB的表達(dá)減弱，在分析聯(lián)合組之間對(duì)NF-κB蛋白的影響時(shí)，當(dāng)姜黃素與5-氟尿嘧啶以高濃度和低濃度按1∶1、1∶2和2∶1的比例作用于肝癌SMMC-7721細(xì)胞48h，無論在高濃度組還是低濃度組，當(dāng)姜黃素與5-氟尿嘧啶的比例為2∶1時(shí)，其細(xì)胞核NF-κB蛋白表達(dá)最強(qiáng);在高濃度組，當(dāng)姜黃素與5-氟尿嘧啶的比例為2∶1時(shí)，細(xì)胞漿NF-KB蛋白的表達(dá)最弱，在低濃度組，當(dāng)姜黃素與5-氟尿嘧啶的比例為1∶2時(shí)，細(xì)胞漿NF-κB蛋白的表達(dá)最弱，聯(lián)合

6、組及單用組與對(duì)照組的COX-2蛋白的表達(dá)減弱，聯(lián)合組與單用組相比表達(dá)減弱，聯(lián)合組之間的比較，無論在高濃度組還是低濃度組，當(dāng)姜黃素與5-氟尿嘧啶的比例為2∶1時(shí)，其COX-2蛋白表達(dá)最弱。
　　結(jié)論:1、姜黃素和5-FU具有抑制肝癌細(xì)胞增殖的作用，且呈濃度依賴性;2、姜黃素與5-氟尿嘧啶在一定的比例下呈現(xiàn)明顯的協(xié)同作用;3、當(dāng)姜黃素與5-氟尿嘧啶在最佳的比例下能明顯提高5-氟尿嘧啶的抗癌作用，且最佳比例可能為2∶1;4、推測(cè)姜黃素聯(lián)