雷公藤內(nèi)酯醇在小鼠同種異體胰島移植中的抗排斥作用.pdf

1、第一部分化學(xué)法誘導(dǎo)小鼠Ⅰ型糖尿病 目的 以化學(xué)法建立小鼠Ⅰ型糖尿病模型。 方法 給C57BL/6小鼠腹腔注射不同劑量鏈尿佐菌素(streptozotocin，STZ)。給藥后2-6天剪尾采血法測(cè)定非空腹血糖并測(cè)量體重。血糖大于20mmol/L，作為誘導(dǎo)糖尿病成功的標(biāo)準(zhǔn)并觀察糖尿病小鼠死亡率。 結(jié)果 以150mg/kg、200mg/kg和225mg/kg的劑量給C57BL/6小鼠腹腔注射ST

2、Z。給藥后2天時(shí)誘導(dǎo)出糖尿病的比率分別為0﹪、60﹪和100﹪；5～6天時(shí)分別為60﹪、100﹪和100﹪。僅在225mg/kg劑量組有1只小鼠死亡(死亡率5﹪)。誘導(dǎo)成功時(shí)小鼠體重下降，下降幅度與STZ劑量相關(guān)。糖尿病小鼠經(jīng)胰島素治療2周后仍然維持高血糖狀態(tài)。 結(jié)論 以STZ(225 mg/kg)腹腔注射是簡(jiǎn)單、安全和有效的制備小鼠Ⅰ型糖尿病模型的方法。 第二部分小鼠胰島分離和胰島移植 目的 建

3、立穩(wěn)定的小鼠胰島分離技術(shù)及胰島移植模型。 方法 采用BALB/c小鼠作為供體。膽總管穿刺后，以膠原酶V溶液進(jìn)行胰腺灌注，37℃水浴靜止消化，再以Ficoll不連續(xù)密度梯度法進(jìn)行胰島細(xì)胞純化。以STZ誘導(dǎo)的C57BL/6糖尿病小鼠作為受體，在腎臟被膜下植入400個(gè)胰島細(xì)胞。移植術(shù)后監(jiān)測(cè)血糖和體重。術(shù)后3天內(nèi)血糖低于10mmol/L作為移植成功的標(biāo)準(zhǔn)。術(shù)后第7天，行荷有移植胰島的小鼠腎臟切除術(shù)，并監(jiān)測(cè)其血糖變化。 結(jié)

4、果 平均每個(gè)BALB/c小鼠胰腺可獲得95±12(85～112)個(gè)胰島細(xì)胞。全部糖尿病C57BL/6小鼠在植入胰島細(xì)胞后，第一天血糖均低于10mmol/L，并且維持至術(shù)后第11天。體重在移植術(shù)后短暫下降后，又逐漸上升，表明糖尿病狀態(tài)得到糾正。術(shù)后第7天切除荷有移植胰島的腎臟后，血糖再度升高并大于20mmol/L，證實(shí)植入的胰島是有功能的。 結(jié)論 以膠原酶V消化和Ficoll不連續(xù)密度梯度法純化可獲得較好的胰島得率

5、。腎被膜下胰島移植治療小鼠糖尿病穩(wěn)定有效。 目的 探討雷公藤內(nèi)酯醇在小鼠同種異體胰島移植中的抗排斥作用。 方法 采用BALB/c小鼠作為供體，進(jìn)行胰島細(xì)胞分離。STZ誘導(dǎo)的C57BL/6糖尿病小鼠作為受體，進(jìn)行腎臟被膜下胰島細(xì)胞移植。術(shù)后分成治療組和對(duì)照組：治療組術(shù)后5天連續(xù)腹腔注射雷公藤內(nèi)酯醇(50μg/kg)，之后隔天注射，至術(shù)后第14天；對(duì)照組給予等體積溶劑(1﹪吐溫80)。術(shù)后監(jiān)測(cè)血糖。移植物排斥定義