真菌竹黃活性成分的藥理作用研究.pdf

1、目的:本研究旨在分離天然藥物真菌竹黃中具有藥理作用的活性成分;以TNFα誘導的小鼠成纖維細胞L929為細胞模型，初步探索真菌竹黃活性成分雙向調(diào)控細胞增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)及分子機理;以人胃癌細胞BGC823為細胞模型，研究真菌竹黃活性成分對BGC823細胞的增殖抑制作用。
　　 方法:(1)索式提取法和聚酰胺層析柱法分離真菌竹黃中調(diào)控細胞增殖的活性成分;(2) SRB法測定竹黃組分extA、extB、extC、extD對L929、BGC

2、823的增殖抑制情況;(3) Hoechst染色法觀察L929、BGC823的細胞形態(tài)學變化;(4)Western Blotting檢測L929內(nèi)NF-κB、COX-2、FLIP蛋白表達水平，檢測BGC823內(nèi)NF-κB、FLIP蛋白表達水平。
　　 結(jié)果:(1)結(jié)合傳統(tǒng)提取法及現(xiàn)代提取工藝，將真菌竹黃初步分離為組分extA、extB、extC、extD;(2) extA在0.03μg/ml-3.75μg/ml時，可有效拮抗TN

3、Fα對L929的增殖抑制作用，7.5μg/ml時則促進其增殖抑制作用;(3) extA可有效拮抗TNFα誘導的L929中NF-κB蛋白表達增加的過程，具有時效性，對COX-2蛋白表達水平影響不大，同時抑制TNFα誘導的FLIP表達水平下降過程，呈濃度正相關(guān)依賴趨勢;(4) extA、extB可有效抑制BGC823增殖，且extB抑制增殖能力更強;(5) extB可上調(diào)BGC823中的NF-κ B、FLIP蛋白表達水平，呈濃度正相關(guān)依賴趨