原發(fā)性肝癌ATM基因表達及其輻射增敏機制研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學博士學位論文原發(fā)性肝癌ATM基因表達及其輻射增敏機制研究姓名：李高峰申請學位級別：博士專業(yè)：放射腫瘤學指導教師：陳龍華20080420中文摘要阻滯或誘導細胞凋亡，是決定細胞輻射敏感性的一個重要因素，而P 2 1 是野生型P 5 3 細胞經歷細胞周期阻滯或凋亡的關鍵。目前對腫瘤輻射增敏基因治療方面的研究主要集中在以下幾個方面：l 、抑制D N A 損傷修復基因功能，如A T M 、D N A ．P K ；2 、抑制／調控細胞周

2、期關卡基因，如P 1 6 、P 2 1 ；3 、恢復某些抑癌基因的功能，如P 5 3 等；4 、抑制相關癌基因的表達，如M D M 2 ，R A S 等。放射生物學研究表明，肝臟屬于放射晚反應組織，具有較強的亞致死損傷修復能力，所以表現(xiàn)出對輻射的抗拒。既往研究證實：肝癌中存在P 5 3 等基因突變，不同P 5 3 狀態(tài)肝癌細胞各自D N A 損傷修復能力不同。是否正是上述基因突變或者還是存在其他某種機制使得D N A 損傷修復基因功能異

3、常上調，肝癌才表現(xiàn)出相對輻射抗拒，這些正是本研究中所要回答的問題。目前國內外尚未見肝癌輻射增敏基因治療相關報道。如果選擇性抑制肝癌細胞照射后的D N A 損傷修復能力，可提高肝癌對放射線的敏感性。A T M 基因是調控D N A 損傷反應的關鍵基因，直接抑制A T M 蛋白激酶活性，降低A T M 蛋白激酶對D N A 損傷反應的調控作用，從而獲得高輻射敏感性；逆轉錄病毒載體可以將外源基因準確的整合至宿主細胞的基因組中，使該外源基因穩(wěn)定

4、、長期表達，同時，逆轉錄病毒載體可以將外源基因準確的整合使其轉導肝癌細胞具有相對特異性，使肝臟這樣的低分裂組織局部應用較為合適。結合臨床三維適形放療技術，可以達到避免抑制肝癌周圍正常肝細胞的D N A 損傷修復功能。R N A 干擾( I Ⅲ礎，R N A i n t e r f e r e n c e ) 是一種序列特異的轉錄后基因沉默現(xiàn)象( P T G S ，p o s t t r a n s c r i p t i o n a l

5、g e n e s i l e n c i n g ) ，主要通過核酸酶將雙鏈R N A 切割成2 1 ．2 5 n t 的干擾性小R N A 即s i R N A ( s m a l li n t e r f e r i n gR N As h o r t i m e r f e n n g R N A ) ，由s i R N A 介導識別并切割同源性靶m R N A 分子而實現(xiàn)。s i R N A 能高效特異性的阻抑基因的表達，R