恩諾沙星在中華絨螯蟹模擬養(yǎng)殖系統(tǒng)中的分布及其耐藥性在轉(zhuǎn)錄水平的研究.pdf

1、采用高效液相法測定水體、底泥、金魚藻、中華絨螯蟹及螺螄的肌肉和內(nèi)臟等不同樣品中的恩諾沙星及其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星的殘留量、分布及消除規(guī)律等變化過程；比較分析了恩諾沙星在弱酸、中性及弱堿模擬養(yǎng)殖系統(tǒng)三種不同酸堿度系統(tǒng)中的環(huán)境行為。恩諾沙星在水體中殘留量低于5μg/L；弱堿性系統(tǒng)底泥中殘留量高達2689.52μg/kg，消除半衰期長達96d。恩諾沙星易在生物體內(nèi)臟內(nèi)積累，其殘留量具有組織差異性。酸堿度對恩諾沙星在水體、底泥及金魚藻中的分布及消除

2、影響較大；對中華絨螯蟹及螺螄等生物體的影響較小。恩諾沙星在弱酸性模擬養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi)各分配相中的殘留量均不同程度的大于中性及弱堿性養(yǎng)殖系統(tǒng)。三種模擬養(yǎng)殖系統(tǒng)中各分配相內(nèi)的藥物殘留量依次為：弱酸＞中性＞弱堿。
　　利用轉(zhuǎn)錄組學方法分析，中華絨螯蟹經(jīng)口灌恩諾沙星后肝胰腺組織獲得了4263個差異表達基因，其中上調(diào)2795個差異表達基因，下調(diào)1468個差異表達基因。通過差異基因的功能注釋，得到了很多藥物代謝和信號轉(zhuǎn)導相關(guān)的差異表達基因功能注釋。

3、注釋結(jié)果表明，恩諾沙星影響中華絨螯蟹肝胰腺的多種復雜生物過程，其中最明顯的能量代謝及胞外刺激應答的信號轉(zhuǎn)導過程。恩諾沙星在中華絨螯蟹肝胰腺中的代謝可能是通過CYP450及谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶等藥物代謝轉(zhuǎn)運蛋白參與的耗能跨膜轉(zhuǎn)運及MAPK等信號轉(zhuǎn)導啟動的細胞應答機制完成的。
　　利用標準質(zhì)控菌株ATCC7966誘導產(chǎn)生對恩諾沙星耐藥的嗜水氣單胞菌7966QR。對耐藥菌株和敏感菌株進行轉(zhuǎn)錄組學分析，獲得差異表達基因218個，其中135個基因