太原地區(qū)產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌的流行趨勢和耐藥機制.pdf

1、目的 分析太原地區(qū)產ESBL大腸埃希菌流行趨勢和耐藥機制，為指導臨床合理使用抗生素，減少耐藥菌株在本地區(qū)擴散及流行病研究提供實驗依據(jù)和指導。 方法 1對臨床分離的耐藥菌株進行紙片擴散法ESBL表型篩選，將篩選出68株ESBL表型陽性菌重新進行生化鑒定、藥敏實驗。 2用PCR方法對產ESBL大腸埃希菌進行分型并測序。 3用三維實驗、多重PCR的方法對耐頭孢西丁的產ESBL大腸埃希菌進行AmpCβ-內

2、酰胺酶的檢測。 4SDS-PAGE對部分菌株外膜蛋白進行分離鑒定。 5ERIC-PCR的方法流行病學分型。 6PCR方法對整合酶及其基因盒進行分析并測序。 結果 1臨床收集耐藥大腸埃希氏菌株中，通過ESBL表型確證試驗共篩選出68株ESBL陽性菌株。其中門診病人10株，住院病人58株。其中外科病房分離占2/3。 2PCR結果TEM型67株為陽性，SHV型04LE030陽性，測序為SHV12

3、，CTX-M2、OXA1、OXA2、OXA10引物PCR電泳未見陽性。CTX-M1陽性21株，CTX-M9陽性48株。 3AMPC三維實驗04LE030弱陽性，多重PCR結果04LE030陽性帶在400BP左右，測序為DHA1。 4SDS-PAGE可見04LE048出現(xiàn)OmpF缺失出現(xiàn)大分子蛋白條帶。 5.ERIC-PCR的方法顯示不同醫(yī)院菌株流行病學分型有差異。 6整合酶ⅠPCR陽性39株，整合酶ⅡPC

4、R陽性1株，其基因盒有兩種結構，均包括氨基糖苷類抗生素和磺胺類抗生素的耐藥的基因。 結論 1產ESBL大腸埃希菌引起的感染以泌尿系統(tǒng)和呼吸道感染為主，住院病人以外科病房為主，門診病人泌尿系統(tǒng)老人多見。 2本地區(qū)產ESBL大腸埃希菌以CTX-M9群、CTX-M1群為主。表型篩選時可使用頭孢噻肟和氨曲南，確證可只使用頭孢噻肟和頭孢噻肟+棒酸。單頭孢他定和頭孢他定+棒酸表型確證試驗陽性的大腸高度懷疑為SHV型。