水草對(duì)中華絨鰲蟹生長(zhǎng)、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)及基因表達(dá)的影響.pdf

1、中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis），俗稱河蟹，是我國(guó)特有的水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)生物。水草在中華絨螯蟹生長(zhǎng)過程中起著重要作用，但水草對(duì)河蟹生長(zhǎng)的影響及分子機(jī)制尚不得知。本文采用養(yǎng)殖生物學(xué)、分子生物學(xué)等研究手段，在室外池塘養(yǎng)殖條件下，以河蟹養(yǎng)殖中常用的伊樂藻作為實(shí)驗(yàn)變量，研究水草對(duì)河蟹生長(zhǎng)、蛻殼、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)以及相關(guān)基因表達(dá)的影響。結(jié)果如下：
　　一、伊樂藻對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響
　　以成蟹階段的中華絨螯蟹為研究材料，

2、分析了有伊樂藻組和對(duì)照組(無伊樂藻)中華絨螯蟹生長(zhǎng)、肌肉、肝胰腺氨基酸和脂肪酸組成等方面的差異,探討伊樂藻對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響。結(jié)果顯示,有伊樂藻組中華絨螯蟹體重、殼長(zhǎng)、殼寬、增長(zhǎng)率與肥滿度均顯著高于無伊樂藻組(P＜0.05),但肝胰腺指數(shù)和性腺指數(shù)差異不顯著(P＞0.05)。伊樂藻組中華絨螯蟹肌肉的氨基酸總量、必需氨基酸和鮮味氨基酸含量均顯著高于無伊樂藻組(P＜0.05);伊樂藻組中雌蟹的肝胰腺中鮮味氨基酸含量也顯著高于無

3、伊樂藻組(P＜0.05),而伊樂藻組和無伊樂藻組的雄蟹肝胰腺氨基酸含量差異并不顯著(P＞0.05)。伊樂藻組和無伊樂藻組的中華絨螯蟹肌肉脂肪酸組成和含量差異不顯著(P＞0.05),但伊樂藻組中華絨螯蟹的肝胰腺飽和脂肪酸(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)和多飽和脂肪酸(PUFA)含量均顯著高于無伊樂藻組(P＜0.05)。綜上所述,伊樂藻不僅有利于中華絨螯蟹的生長(zhǎng),而且能夠改善中華絨螯蟹的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。
　　二、轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析水草對(duì)中華

4、絨螯蟹的影響
　　本章應(yīng)用高通量測(cè)序技術(shù)，獲得了有水草和無水草養(yǎng)殖環(huán)境下中華絨螯蟹肌肉、眼柄、肝胰腺和性腺組織混合樣品的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)。通過De novo拼接，共獲得47167個(gè)河蟹轉(zhuǎn)錄本，其中33133個(gè)轉(zhuǎn)錄本能被NCBT-NR數(shù)據(jù)庫(kù)注釋，26792個(gè)轉(zhuǎn)錄本能被uniport數(shù)據(jù)庫(kù)注釋。基因差異表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，有水草和無水草河蟹轉(zhuǎn)錄組共鑒定出35個(gè)差異表達(dá)基因，其中13個(gè)基因在有水草河蟹中高表達(dá)，22個(gè)基因在無水草河蟹中高表達(dá)。GO功

5、能富集結(jié)果表明，無水草河蟹中高表達(dá)基因主要是抑制ATP酶活性和對(duì)Wnt通路產(chǎn)生抑制的基因，而與無水草河蟹相比，有水草河蟹中高表達(dá)基因主要富集到與核糖體蛋白、肌球蛋白重鏈相關(guān)的基因，這些基因有利于河蟹的性腺發(fā)育、個(gè)體生長(zhǎng)以及對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力。初步研究表明，有水草與無水草養(yǎng)殖環(huán)境下的中華絨螯蟹存在差異表達(dá)基因，水草對(duì)中華絨螯蟹基因表達(dá)模式產(chǎn)生一定的影響，這為進(jìn)一步研究水草對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)、蛻殼和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)影響的分子作用機(jī)制提供了參考。

6、　　三、水草對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)、蛻殼和消化酶基因表達(dá)的影響
　　本章以扣蟹階段的中華絨螯蟹為實(shí)驗(yàn)材料，設(shè)置真水草組、假水草組與無水草組三個(gè)實(shí)驗(yàn)組，將扣蟹放入池塘網(wǎng)籠里養(yǎng)殖，其他環(huán)境條件保持一致，對(duì)第一次蛻殼與第二次蛻殼中華絨螯蟹的體重增重率、成活率、蛻殼周期以及相關(guān)消化酶基因表達(dá)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)對(duì)比，結(jié)果表明：經(jīng)過第一次蛻殼，三組網(wǎng)籠中華絨螯蟹的體重增重率未出現(xiàn)顯著差異(P＞0.05)，而真水草組和假水草組的成活率明顯高于無水草組。在第二次

7、蛻殼后，有水草組和假水草組體重增重率、成活率以及肥滿度都明顯高于無水草組(P＜0.05)，但真水草組和假水草組無明顯差異(P＞0.05)。綜合兩個(gè)蛻殼周期的數(shù)據(jù)比較，發(fā)現(xiàn)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的平均蛻殼周期規(guī)律為真水草組<假水草組<無水草組（P＜0.05）。三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的中華絨螯蟹腸道內(nèi)消化酶基因表達(dá)量不存在顯著的差異(P＞0.05)。綜上所述，在同一水質(zhì)環(huán)境下，水草對(duì)中華絨螯蟹影響主要表現(xiàn)為提高增重率、成活率和肥滿度、縮短蛻殼周期，但對(duì)腸道內(nèi)消化酶