毛細(xì)管電泳分析茶黃素類(lèi)和茶多酚的方法與應(yīng)用研究.pdf

1、茶多酚及其氧化產(chǎn)物茶黃素類(lèi)是茶葉中重要的生化品質(zhì)成分，也是對(duì)人體健康最為有益的物質(zhì)。為了建立茶多酚和茶黃素類(lèi)的高效、快速、簡(jiǎn)便的分析方法，本文對(duì)毛細(xì)管電泳儀分析茶黃素類(lèi)和茶多酚的分離檢測(cè)條件進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化和方法評(píng)估，并將建立的方法應(yīng)用于茶葉品質(zhì)檢測(cè)、茶黃素類(lèi)體外酶促氧化過(guò)程監(jiān)控和茶葉深加工產(chǎn)品(茶多酚、茶黃素類(lèi)等)質(zhì)量的檢驗(yàn)。研究結(jié)果如下： 1.建立了毛細(xì)管電泳分析茶黃素類(lèi)的方法。在250mmol/LH3BO4、10mmol/L

2、KH2PO4、0.75mmol/LSDS和20％(v/v)乙腈組成的pH值為7.5的電泳介質(zhì)中，選擇25kV電壓、20℃柱溫和200m波長(zhǎng)檢測(cè)，可在10min以?xún)?nèi)將標(biāo)樣中的四種主要茶黃素類(lèi)單體分離，并獲得較高的檢測(cè)靈敏度。四種茶黃素類(lèi)單體濃度與峰面積值之間的相關(guān)系數(shù)r=0.9945～0.9990，檢測(cè)限在0.64～0.53μg/ml之間，加標(biāo)回收率為92.50～108.36％，變異系數(shù)≤2.67％。應(yīng)用該方法分析了紅茶樣品和茶黃素類(lèi)產(chǎn)品

3、中TFs的含量，紅茶茶湯樣品需用乙酸乙酯萃取處理才可達(dá)到較好的分離效果和基線(xiàn)水平，而茶黃素類(lèi)產(chǎn)品則可不經(jīng)萃取處理，直接溶解進(jìn)行分析，證明該方法可快速、準(zhǔn)確分析茶黃素類(lèi)產(chǎn)品中茶黃素類(lèi)的含量。 2.建立了毛細(xì)管電泳同時(shí)分析六種兒茶素類(lèi)的方法。用含有200mmol/LH3BO4(pH7.7)、10mmol/LKH2PO4、9mmol/Lβ-CD和27.5％乙腈(v/v)的電泳介質(zhì)，在電壓25kV、柱溫30℃下分離和波長(zhǎng)200nm處檢測(cè)

4、，可在7.5min以?xún)?nèi)將EGCG、ECG、EC、EGC、GC和C六種兒茶素組分全部分離，有效提高了EGC/EC/C、EGCG/ECG之間的分離度，各組分標(biāo)樣濃度與峰面積值之間呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.9985～0.9998，檢測(cè)限為0.39～0.78μg/ml，各組分的加標(biāo)回收率在96.60～113.83％之間，方法變異系數(shù)小于3.54％。 3.確立了毛細(xì)管電泳同時(shí)分析四種茶黃素類(lèi)和六種兒茶素類(lèi)的方法。應(yīng)用2中所述的緩沖

5、體系和電泳條件，不僅可將六種兒茶素類(lèi)化合物分離，且可同時(shí)分離四種茶黃素類(lèi)物質(zhì)，使這十種物質(zhì)在8min內(nèi)全部基線(xiàn)分離，峰形良好，各組分標(biāo)樣濃度與峰面積值之間呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.9907～0.9998，檢測(cè)限為0.39～0.78μg/ml，各組分的加標(biāo)回收率在91.53～113.49％之間，方法變異系數(shù)小于5％。應(yīng)用該方法對(duì)茶多酚氧化制備茶黃素類(lèi)的動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究，可同時(shí)測(cè)定反應(yīng)物的種類(lèi)、含量變化趨勢(shì)和生成物的種類(lèi)、變化趨勢(shì)，且

6、快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，是一種特別適合于對(duì)茶多酚氧化制備茶黃素類(lèi)過(guò)程中監(jiān)測(cè)兒茶素類(lèi)和茶黃素類(lèi)變化的方法。 4.在毛細(xì)管電泳同時(shí)分析四種茶黃素類(lèi)和六種兒茶素類(lèi)化合物的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究同時(shí)分析四種茶黃素類(lèi)、六種兒茶素類(lèi)、蘆丁、槲皮素、對(duì)香豆酸、綠原酸等茶多酚和咖啡堿共十五種物質(zhì)的方法與應(yīng)用。改變電泳介質(zhì)組分乙腈的濃度由原來(lái)的27.5％降至25％(v/v)，其余組成和濃度均不改變，在柱溫30℃，電壓30kV和毛細(xì)管規(guī)格為50μm×50cm