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文檔簡介
1、目的:闡明手掌參醇提物(GcAe)對染矽塵大鼠不同時間點肺組織NF-κB、α-SMA和血清NF-κB、TGF-β1表達(dá)以及Ⅰ、Ⅲ型膠原合成的影響,探討GcAe對矽肺的可能作用機制。
方法:本實驗選用SPF級近交群雄性Wistar大鼠128只,隨機將大鼠分為4個實驗組,每組32只,即對照組(氣管內(nèi)注入0.9%NaCl)、染矽塵組、手掌參組(模型治療組)和漢防己組(標(biāo)準(zhǔn)藥物治療組)。
各組均采用氣管暴露法,對照組
2、每只大鼠氣管內(nèi)注入1ml0.9%NaCl注射液,染矽塵組與各治療組注入1ml濃度為50mg/ml的矽塵滅菌混懸液。建模后第二天,手掌參組按手掌參醇提物0.8g/100g的量每天灌胃;漢防己(TT)組按漢防己甲素(TT)液5mg/100g的量隔天灌胃;對照組、染矽塵組給予蒸餾水2ml每天灌胃,如此直到將動物處死。模型建立后于7d、14d、21d和28d的4個時間點分別取8只大鼠處死。計算肺臟器系數(shù),用肺組織普通石蠟切片HE染色觀察大鼠肺組
3、織矽結(jié)節(jié)。用免疫組織化學(xué)SP法觀察NF-κB、α-SMA的表達(dá),ELISA檢測血清NF-κB、TGF-β1含量,天狼猩紅染色法結(jié)合偏振光顯微鏡觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原。應(yīng)用Image-Pro Plus Version4.5 for windowsTM圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。
結(jié)果:1、肺組織HE染色結(jié)果證實氣管暴露法成功建立矽肺大鼠模型。
2、染矽塵組大鼠各時間點肺臟器系數(shù)均高于對照組,在7d、14d、21d、28
4、d有顯著性差異。與染矽塵組比較,GcAE組肺臟器系數(shù)在14d、21d、28d時顯著降低,差異有顯著性,TT組在14d、28d時顯著降低,差異有顯著性。
3、手掌參對染矽塵大鼠Ⅰ、Ⅲ型膠原合成的影響。與對照組比較,染矽塵組、手掌參組和漢防己組各時間點Ⅰ型膠原面積百分比均高于對照組,差異有顯著性;與染矽塵組比較,手掌參組和漢防己組各時間點Ⅰ型膠原面積百分比明顯低于染矽塵組,差異有顯著性;與對照組比較,染矽塵組各時間點Ⅲ型膠原面
5、積百分比均高于對照組,差異有顯著性:與染矽塵組比較,手掌參組和漢防己組各時間點Ⅲ型膠原面積百分比均低于染矽塵組,手掌參組14d、21d差異有顯著性,漢防己組14d、21d、28d差異有顯著性。
4、染矽塵大鼠在7d、14d肺組織NF-κB表達(dá)情況。與對照組比較,染矽塵組、GcAE組及TT組肺組織NF-κB積分光密度均升高,差異有顯著性;與染矽塵組比較,GcAE組及TT組NF-κB積分光密度均降低,差異有顯著性。
6、 5、染矽塵大鼠在7d、14d肺組織α-SMA表達(dá)情況。與對照組比較,染矽塵組、GcAE組及TT組肺組織α-SMA積分光密度均升高;差異有顯著性;與染矽塵組比較,GcAE組及TT組均明顯低于染矽塵組,差異有顯著性。
6、染矽塵大鼠在各時間點血清NF-κB表達(dá)情況。與對照組比較,染矽塵組各時間點血清NF-κB表達(dá)水平均升高,差異有顯著性;手掌參組、漢防己組與對照組比較均高于對照組;與染矽塵組比較,明顯低于染矽塵組,7d、2
7、8d差異有顯著性;
7、染矽塵大鼠在各時間點血清TGF-β1表達(dá)情況。與對照組比較,染矽塵組各時間點血清TGF-β1表達(dá)水平均升高,14d、21d、28d差異有顯著性;漢防己組、手掌參組與對照組比較,7d時低于對照組,14d、21d、28d均高于對照組,差異無顯著性。與染矽塵組比較,各時間點均低于染矽塵組,漢防己組在7d差異有顯著性,手掌參組在21d差異有顯著性;
結(jié)論:
1、手掌參醇提物可以明
8、顯降低染矽塵大鼠模型肺臟器系數(shù)增加。
2、手掌參醇提物對矽塵誘導(dǎo)大鼠肺組織Ⅰ、Ⅲ型膠原合成具有抑制作用。
3、在矽肺的發(fā)生發(fā)展過程中,NF-κB、α-SMA、TGF-β1表達(dá)與纖維化階段Ⅰ、Ⅲ型膠原的合成密切相關(guān),故染矽塵大鼠肺組織各時間點NF-κB、α-SMA表達(dá)增加,血清NF-κB、TGF-β1水平升高,可能在矽肺纖維化形成過程中起著重要作用。手掌參醇提物能夠抑制矽塵誘導(dǎo)大鼠肺組織NF-κB、α-SMA蛋
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