益生菌對(duì)急性肝損傷腸源性內(nèi)毒素血癥保護(hù)作用的研究.pdf

1、研究背景：
　　 大量臨床觀察表明，肝硬化患者多伴有不同程度的腸源性內(nèi)毒素血癥。導(dǎo)師劉立新前期研究發(fā)現(xiàn)硫代乙酰胺誘導(dǎo)肝纖維化的同時(shí)伴有腸源性內(nèi)毒素血癥的形成。正常情況下，由腸道細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素進(jìn)入肝臟后被清除；肝損傷時(shí)，肝臟枯否細(xì)胞系統(tǒng)功能減弱、腸道菌群失調(diào)、腸黏膜屏障損傷不能有效地清除內(nèi)毒素進(jìn)入門靜脈，形成腸源性內(nèi)毒素血癥，而急性肝損傷是否伴有腸源性內(nèi)毒素血癥，目前尚無(wú)報(bào)道。臨床常用的微生態(tài)制劑，可以抑制腸道需氧菌生長(zhǎng)繁殖，扶

2、持厭氧菌的生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào)，降低血漿內(nèi)毒素水平，減輕腸源性內(nèi)毒素血癥。大量研究已證實(shí)培菲康可改善慢性肝損傷腸道菌群失調(diào)，降低血漿內(nèi)毒素水平，減輕腸源性內(nèi)毒素血癥，而整腸生對(duì)急性肝損傷腸源性內(nèi)毒素血癥是否有保護(hù)作用，尚不清楚。為了闡明此問(wèn)題，設(shè)計(jì)了本課題。
　　 目的：
　　 明確急性肝損傷是否伴有腸源性內(nèi)毒素血癥的形成及益生菌對(duì)急性肝損傷腸源性內(nèi)毒素血癥是否具有保護(hù)作用。
　　 方法：
　　 40只

3、SD雄性大鼠隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、模型組、整腸生低劑量組、整腸生高劑量組及培菲康組。采用皮下注射硫代乙酰胺（TAA）誘導(dǎo)大鼠急性肝損傷模型，取腹主動(dòng)脈血檢測(cè)血漿內(nèi)毒素，血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平的變化，HE染色觀察肝組織形態(tài)學(xué)改變，用TUNEL方法檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)果：
　　 (1)HE染色分析結(jié)果：與正常對(duì)照組相比，模型組肝細(xì)胞

4、呈彌漫性大片狀壞死，肝竇結(jié)構(gòu)被破壞，可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。而與模型組相比，整腸生低、高劑量組和培菲康組肝組織損傷明顯改善。
　　 (2)血漿內(nèi)毒素結(jié)果顯示：模型組血漿內(nèi)毒素的表達(dá)較正常對(duì)照組顯著增強(qiáng)（內(nèi)毒素：0.086±0.02vs0.34±0.07，P＜0.01）；整腸生低、高劑量組和培菲康組內(nèi)毒素的表達(dá)均較模型組明顯降低(內(nèi)毒素：0.16±0.05vs0.34±0.07，0.09±0.05vs0.34±0.07，0.11±0

5、.04vs0.34±0.07，P＜0.01)。
　　 (3)血清ALT、AST、LDH、MDA結(jié)果顯示：模型組血清中ALT、AST、LDH、MDA的表達(dá)均較正常對(duì)照組顯著增強(qiáng)（ALT:5.99±2.21vs47.05±13.06，P＜0.01；AST:18.42±5.28vs46.93±42.93,P＜0.01;LDH:2555.69±622.19vs4443.07±605.68,P＜0.01;MDA:3.48±0.63vs5.

6、40±1.26，P＜0.01)。整腸生低、高劑量組和培菲康組ALT、AST、LDH、MDA較模型組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(ALT:32.45±17.4vs47.05±13.06，29.35±12.31vs47.05±13.06,30.08±17.84vs47.05±13.06,P＞0.05;AST:34.73±6.02vs46.93±42.93,35.83±7.54vs46.93±42.93,31.63±12.46vs46.93±42.

7、93,P＞0.05;LDH:4295.79±780.9vs4443.07±605.68,3804.46±674.65vs4443.070605.68,4142.33±753.2vs4443.07±605.68,P＞0.05;MDA:5.08±1.15vs5.40±1.26,5.12±0.91vs5.40±1.26,4.82±0.73vs5.40±1.26，P＞0.05)。
　　 (4)TUNEL法檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示：熒光顯微

8、鏡下和普通光鏡下模型組肝組織中凋亡肝細(xì)胞均較正常對(duì)照組明顯增多，而整腸生低、高劑量組和培菲康組均僅見(jiàn)少量凋亡細(xì)胞（34.13％±12.5g％vs3.31％±2.23,35.71％±12.87％vs3.10％±2.03％，P＜0.01：11.14％±6.04％vs34.13％±12.5g％,8.35％±5.58％vs34.13％±12.59％,9.89％±5.12％vs34.13％±12.5g％，P＜0.01；10.23±6.60％vs3