TaWRKY45轉(zhuǎn)錄因子在小麥高溫抗條銹病中的功能研究.pdf

1、由條形柄銹菌(Puccinia striiformisf sp.tritici, Pst)引發(fā)的小麥條銹病是一種世界性病害。它通過(guò)氣流遠(yuǎn)距離傳播，嚴(yán)重威脅著小麥的生產(chǎn)安全，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。小麥抗病品種往往由于條銹菌生理小種毒性的變異而喪失抗病性。因此，選育非小種專(zhuān)化性、抗病持久的小麥品種是解決條銹菌危害的有效方法。小偃6號(hào)是一種全生育期高溫抗條銹性的小麥品種，能在較高溫度誘導(dǎo)下產(chǎn)生低反應(yīng)型抗病性，且具有非小種專(zhuān)化性和持久抗病性特征

2、。WRKY轉(zhuǎn)錄因子在小麥抗條銹病中起著重要的作用，其中TaWRKY45轉(zhuǎn)錄因子在小麥對(duì)赤霉病、葉銹病、白粉病等病害的抗病過(guò)程起著正向調(diào)控的作用，但其在小麥高溫抗條銹病中的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　本研究以小偃6號(hào)小麥品種和條銹菌CYR32生理小種為試驗(yàn)材料，克隆了Ta WRKY45基因，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(Real-time quantitative PCR，qRT-PCR)研究了TaWRKY45的表達(dá)模式，并利用病毒誘導(dǎo)的基

3、因沉默(VIGS)技術(shù)，研究了TaWRKY45沉默后對(duì)小偃6號(hào)高溫抗條銹病的影響。取得了以下主要結(jié)果:
　　1.克隆得到TaWRKY45基因。該序列大小為1234 bp，具有完整的開(kāi)放閱讀框(ORF)，編碼293個(gè)氨基酸。蛋白結(jié)構(gòu)域分析顯示，TaWRKY45在N端含有一個(gè)保守的WRKYGQK，在C端含有一個(gè)C2-HC型的鋅指結(jié)構(gòu)。序列比對(duì)結(jié)果顯示TaWRKY45與水稻OsWRKY45蛋白親緣關(guān)系最近，支持率達(dá)到99％。
　　

4、2.TaWRKY45在小偃6號(hào)根、莖、葉中均有表達(dá)，且根中的表達(dá)量顯著高于莖、葉中的表達(dá)量。水楊酸(SA)處理和接菌后經(jīng)高溫處理均可誘導(dǎo)TaWRKY45上調(diào)表達(dá)。
　　3.TaWRKY45在小偃6號(hào)高溫抗條銹病進(jìn)程中起著正向調(diào)控作用。TaWRKY45基因沉默后，其表達(dá)量下降了50％～70％。接種條銹菌后第8天，經(jīng)高溫處理， TaWRKY45基因沉默的葉片上夏孢子堆數(shù)目增多，單個(gè)侵染點(diǎn)的條銹菌線性長(zhǎng)度和夏孢子堆線性長(zhǎng)度增加，葉片壞死