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文檔簡介
1、目的: SD大鼠腹腔內注射阿霉素(ADR)是研究擴張型心肌病心肌重塑的公認動物模型,本研究通過這一經典模型,研究AT1受體阻滯劑氯沙坦對大鼠心肌重塑的影響及其與骨橋蛋白(OPN)表達的關系,從分子水平探討氯沙坦對心肌纖維化的保護作用機制,為防治心血管疾病心肌重塑的新思路提供一定的實驗依據。
方法:將8周齡雄性SD大鼠(體重250±10g)隨機分為三組:正常對照組(N組):生理鹽水2ml/kg腹腔注射,每周1次,共8周;模型
2、組(M組):鹽酸阿霉素2mg/kg腹腔注射,每周1次,共8周;氯沙坦治療組(L組):鹽酸阿霉素2mg/kg腹腔注射,每周1次,共8周,氯沙坦10mg/kg灌胃,于第1次阿霉素應用后次日開始,每日1次,共8周。末次注射ADR后10天,無菌取出心臟。本實驗分為四部分:(1)大鼠心肌病理改變的觀察。(2)各組SD大鼠心重指數(CWI)、左室指數(LVWI)的測定。(3)免疫組化方法觀察大鼠心肌組織的Ⅰ、Ⅲ型心肌膠原的表達。(4)Western
3、 blot方法檢測大鼠心肌組織OPN的表達。
結果:
1.光鏡下心肌病理改變:正常對照組心肌細胞排列均勻整齊,橫紋清楚,細胞大小均一,心肌細胞間隙無變化。模型組心肌細胞肥大、伸長、灶狀壞死,肌質變性,核大、深染,間質纖維化、膠原增生,證實阿霉素誘導SD大鼠心肌膠原重塑模型是成功的。氯沙坦組大部分心肌組織呈平行排列,結構清晰,間質有少量疏松結締組織。L組死亡率低于M組(8.33%vs25.00%)。
4、 2.CWI和LVWI:與正常對照組(2.78±0.02,2.18±0.01)相比,模型組CWI和LVWI(2.86±0.05,2.20±0.02)均升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。氯沙坦干預可使CWI和LVWI不同程度下降(2.82±0.05,2.19±0.03),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。但氯沙坦組CWI和LVWI仍高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
3.心肌Ⅰ、Ⅲ型膠原的表達:模型組
5、(25.44±0.98,20.05±0.40)與正常對照組(8.20±0.47,5.21±0.62)相比,Ⅰ、Ⅲ型心肌膠原的表達均升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。氯沙坦干預后,Ⅰ、Ⅲ型心肌膠原的表達均降低(14.68±0.66,11.27±0.44),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。但氯沙坦治療組與正常對照組比較,Ⅰ、Ⅲ型心肌膠原的表達仍有升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
4.心肌組織OPN的表達:模型組
6、(1.11±0.09)與正常對照組(0.43±0.01)相比,OPN表達增多,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。氯沙坦干預后,OPN表達降低(0.80±0.11),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。但氯沙坦治療組與正常對照組比較,OPN的表達仍有升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
結論:
1.在阿霉素誘導的SD大鼠心肌重塑中,骨橋蛋白參與了心肌纖維化的信號轉導。
2.氯沙坦可以部分通過抑制
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