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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)1/2和核轉(zhuǎn)錄因子-KB(NF-κB)在膽紅素誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡過程中的作用。
方法:
無菌條件下,取17-19日胎齡的SD大鼠的海馬組織,原代培養(yǎng)8天,神經(jīng)元鑒定及純度測(cè)定后完全隨機(jī)法分為3組:處理組(膽紅素處理神經(jīng)元)、抑制組(ERK1/2抑制劑PD98059+膽紅素)以及對(duì)照組(加DMSO)。采用改良噻唑藍(lán)比色法(MTT法)和Hoechst3
2、3342DNA染色法,觀察各組細(xì)胞存活率及形態(tài)學(xué)特征；流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡；免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)NF-κB蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:
(1)處理組細(xì)胞存活率(85.418±1.406)％,明顯低于對(duì)照組的(99.990±2.782)％,而高于抑制組的(63.951±1.148)％(P＜0.01)；
(2)處理組細(xì)胞凋亡率(20.767±1.662)％,明顯高于對(duì)照組(4.2±1.058)％,而低于抑制組
3、(35.167±1.041)(P＜0.01)；
(3)處理組海馬神經(jīng)細(xì)胞中亞單倍體DNA(4.15％),明顯高于對(duì)照組的(1.62％),而低于抑制組的(5.38％)；
(4)處理組NF-κB蛋白光密度值、陽性細(xì)胞率(0.306±0.072)、(6.882±2.626)％,對(duì)照組和抑制組NF-κB蛋白光密度值、陽性細(xì)胞率分別為(0.157±0.037)、(0.986+0.795)％,(0.249±0.059)、
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