柿子花發(fā)育相關的MADS-box基因的克隆與表達分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、植物典型的花器官發(fā)育包括形成萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊四輪花器官,而柿子的花器官卻是單性花,大多表現(xiàn)為雌花型,其雄蕊退化;僅有少數(shù)授粉品種具有雄花(如禪寺丸)。這與典型花器官發(fā)育的成花機理不盡相同。植物花器官發(fā)育過程中的大多數(shù)基因都屬于MADS-box基因。本試驗以雌花型柿子'陽豐'的花為試材,通過運用RT.PcR技術及RAcE法,克隆得到了一個與其花發(fā)育相關的MADS-box基因,并對其進行了表達分析。為進一步了解柿子花發(fā)育的分子機制、調

2、控柿子的開花結實提供一定的理論依據(jù)。 其主要結果如下:(1)克隆得到了柿子花發(fā)育相關的MADS-box基因DkMADSl的cDNA全長,GenBank登錄號為DQ412058。該基因包含起始密碼子(ATG),終止密碼子(TGA),全長1193bp,含有747 bp的開放閱讀框,編碼249個氨基酸的蛋白序列。分子量29 KD,等電點7.21,是一個中性蛋白。該蛋白具有完整的植物MADS--box蛋白的結構特征,包括保守的MADS區(qū)

3、、半保守的K區(qū)、I區(qū)和C區(qū)。 (2)NCBI上經(jīng)蛋白序列相似性分析,結果發(fā)現(xiàn),該蛋白與AGL2亞族MADS-box基因具很高同源性,與矮牽牛的PMADS12和番茄的TM29分別具有72%和70%的同源性;系統(tǒng)進化聚類分析表明,該基因屬于植物MIKC型AGL2亞族MADS-box基因。(3)RT-PCR表達分析表明,DkMADSI基因在柿予'陽豐'萼片、花瓣、子房及'禪寺丸'的雄蕊中均表達,而在葉片中不表達。 (4)Southem雜交結果

4、表明,柿子基因組中存在DkMADSl基因,而且DkMADSl基因在柿子基因組中是單挎貝的。 本實驗克隆得到的柿子花發(fā)育相關的MADS-box基因,包括保守的MADS區(qū)、半保守的K區(qū)、1區(qū)和C區(qū),符合植物MADS-box基因的顯著特征,則該基因應屬于植物MADS-box基因家族成員。經(jīng)同源性比對及系統(tǒng)進化樹分析,將該基因預測的蛋白歸類于AGL2亞族的MADS-box基因家族。前人研究發(fā)現(xiàn),不同物種中AGL2亞族MADS-box基因

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