鹽澤螺旋藻藻藍(lán)蛋白和多糖的分離純化及其抑制腫瘤活性的初步研究.pdf

1、該文主要研究了以下內(nèi)容:①研究了鹽澤螺旋藻藻藍(lán)蛋白和多糖的最佳獲取條件.②分離純化藻藍(lán)蛋白和多糖,得到純?cè)逅{(lán)蛋白c-PC和純化多糖SP,并對(duì)c-PC和SP進(jìn)行純度鑒定和組成分析.③從體外腫瘤細(xì)胞、小鼠黑色素瘤模型及小鼠免疫系統(tǒng)三方面著手,對(duì)藻藍(lán)蛋白、多糖及其純化產(chǎn)物c-PC、SP抑制腫瘤的活性作了初步的探討.為了最大量的獲取藻藍(lán)蛋白和多糖,進(jìn)行了兩者最佳獲取條件的研究,并得出了初步的結(jié)論.在該實(shí)驗(yàn)中K<,2>HPO<,4>和NaCl濃度

2、的變化對(duì)藻細(xì)胞的c-PC和粗多糖含量影響不明顯.根據(jù)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果:鹽澤螺旋藻培養(yǎng)的光強(qiáng)應(yīng)為4000lux以上,光暗周期為14:10,培養(yǎng)基中NaHCO<,3>濃度為5g/L,NaNO<,3>濃度為2.5g/L,在穩(wěn)定后期收獲藻體并提取藻藍(lán)蛋白、多糖.通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)粗藻藍(lán)蛋白、粗多糖及c-PC、SP,可以選擇性的抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),并能夠顯著的促進(jìn)正常細(xì)胞的生長(zhǎng).粗藻藍(lán)蛋白和c-PC的光敏實(shí)驗(yàn)表明:在碘鎢燈照射下,粗藻藍(lán)蛋白和c-PC

3、比未經(jīng)光照更有效的抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)抑制作用.通過(guò)對(duì)黑色素瘤A375細(xì)胞形態(tài)的觀察,發(fā)現(xiàn)加樣后,細(xì)胞周圍產(chǎn)生凋亡小體;結(jié)合Hochest染色和細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸熒光顯示方法,我們初步認(rèn)為藻藍(lán)蛋白和多糖是通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng).我們成功建立了ICR小鼠的黑色素瘤模型以驗(yàn)證體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,并進(jìn)行了樣品對(duì)小鼠免疫活性的研究.在小鼠腫瘤模型實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn)給粗藻藍(lán)蛋白和粗多糖組2周后腫瘤有明顯的減小甚至消