shRNA阻抑前列腺癌細(xì)胞雄激素受體和hTERT基因表達(dá)的研究.pdf

1、本研究通過(guò)構(gòu)建AR及hTERT基因小發(fā)夾RNA(small hairpin RNA,shRNA)的真核表達(dá)載體,觀察shRNA對(duì)AR及hTERT基因表達(dá)的抑制效果,研究AR及hTERT基因封閉后前列腺癌細(xì)胞功能包括細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞凋亡、端粒酶活性等的變化,更深層次地說(shuō)明AR和hTERT基因在前列腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用.構(gòu)建含有AR及hTERT兩個(gè)基因shRNADNA模板的重組表達(dá)質(zhì)粒,探討單個(gè)shRNA質(zhì)粒同時(shí)抑制LNCaP細(xì)胞hTERT

2、和AR基因表達(dá)的可行性,為研究新型前列腺癌基因治療藥物提供理論依據(jù).本研究分為3部分:實(shí)驗(yàn)第一部分題目:RNA干擾技術(shù)靶向hTERT基因抗前列腺癌的研究.研究目的:觀察hTERT shRNA對(duì)前列腺癌細(xì)胞同源基因表達(dá)的抑制效果及抗腫瘤效應(yīng).結(jié)論:hTERT shRNA能明顯抑制前列腺癌細(xì)胞hTERT基因的表達(dá),降低端粒酶活性,對(duì)雄激素依賴性細(xì)胞和雄激素非依賴性細(xì)胞生長(zhǎng)都有明顯的抑制作用.實(shí)驗(yàn)第二部分題目:shRNA阻抑前列腺癌細(xì)胞雄激素

3、受體基因表達(dá)及其影響的研究.研究目的:觀察不同AR shRNA對(duì)LNCaP細(xì)胞AR基因表達(dá)的抑制作用及抗腫瘤效應(yīng).結(jié)論:AR1 shRNA對(duì)LNCaP細(xì)胞AR基因表達(dá)無(wú)明顯抑制作用.AR2 shRNA能夠特異、有效地抑制LNCaP細(xì)胞AR基因的表達(dá),顯著抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng).實(shí)驗(yàn)第三部分題目:單個(gè)shRNA質(zhì)粒同時(shí)抑制LNCaP細(xì)胞hTERT和AR表達(dá)的可行性研究.研究目的:探討單個(gè)shRNA質(zhì)粒聯(lián)合抑制LNCaP細(xì)胞hTERT和AR基因表