乳酸桿菌發(fā)酵濾液對人宮頸癌細胞株Hela細胞的抑制作用及機制研究.pdf

1、目的：宮頸癌發(fā)病率居婦科惡性腫瘤首位，近年來發(fā)病率有明顯上升趨勢。本文通過觀察乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液對宮頸癌細胞株Hela細胞的體外增殖、細胞周期、凋亡的影響，證實乳酸桿菌發(fā)酵濾液對宮頸癌細胞的抑制作用。并初步探討可能的機制，為進一步確定乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液中抑制宮頸癌的有效成份，從而開發(fā)出安全、有效、低成本的預防和治療宮頸癌的藥物打下基礎，并為開發(fā)乳桿菌制劑的新用途打開思路。 方法：1.用MTT法研究不同濃度乳酸

2、桿菌DM9811發(fā)酵濾液在不同時間對Hela細胞的抑制作用，在此基礎上研究脂肪酸、菌體核酸在不同時間對Hela細胞的抑制作用。2.用光鏡、電鏡和流式細胞儀分析不同濃度乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液對Hela細胞凋亡的誘導。3.用流式細胞儀分析不同濃度乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液對Hela細胞細胞周期的影響。 結果：1.不同濃度乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液及相關物質在不同時間對Hela細胞的抑制作用顯示：(1)乳酸桿菌DM9811發(fā)

3、酵濾液各濃度組對Hela細胞的生長均有抑制作用，且這種抑制作用呈劑量-時間依賴方式。24h、48h、72h達到半數(shù)抑制率的發(fā)酵濾液濃度分別為8.9﹪、5.3﹪、3.8﹪。當發(fā)酵濾液濃度達10﹪，作用時間為24、48、72小時時抑制率分別為55.1﹪、63.8﹪、71.2﹪，陽性對照順鉑的抑制率為52.6﹪、62.9﹪、72.0﹪，其抑制作用與化療藥物順鉑的抑制作用無統(tǒng)計學差異。(2)乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液脂肪酸對Hela細胞的生長

4、有一定抑制作用，抑制率在7.0-34.0﹪之間。(3)乳酸桿菌DM9811菌體核酸對Hela細胞的生長有抑制作用，抑制率為9.7-53.4﹪，呈劑量-時間依賴方式。72h達到半數(shù)抑制率核酸的濃度為5.5μg/ml。 2.乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液可誘導宮頸癌Hela細胞凋亡。形態(tài)學觀察Hela細胞，可見細胞變形，細胞皺縮，體積變小，細胞間隙增大，細胞核固縮。流式細胞儀分析，1﹪、2﹪的乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液在48h、72